作者：李静 檀卫平 吴葆菁 蓝丹 李文益 麦贤弟 范玲玲

【摘要】  【目的】 探讨白细胞介素-17(IL-17)在中重度儿童哮喘发病、气道中性粒细胞炎症反应中的作用。【方法】 中重度持续哮喘发作期儿童45例，其中中度持续组(20例)与重度持续组(25例);以健康儿童20例为对照组。以酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患儿外周血单个核细胞(PBMC)在CD3和CD28单克隆抗体刺激下分泌的IL-17水平，检测诱导痰中性粒细胞数量;对以上病例进行联合

　　1 材料与方法

　　1.1 研究对象

　　中重度持续发作哮喘儿童45例(男27例，女18例)，其中中度持续组(20例)与重度持续组(25例)，平均年龄6.9(S = 2.4)岁。于其急性发作期取血及痰液标本，并行肺功能检测。经联合治疗后(治疗方案参照2007GINA方案)病情缓解儿童20例，纳入缓解组研究对象(男13例，女7例)，平均年龄6.7(S = 2.3)岁。诊断、分级、分期标准参照中华医学会儿科分会2008年制定的儿童支气管哮喘防治常规[8]。剔除标准：①近2周口服或静脉使用过糖皮质激素或免疫调节剂;②第一次喘息发作;③哮喘合并其他免疫性疾病如结核病、系统性红斑狼疮、幼年类风湿性关节炎等;④心肺功能衰竭者。正常对照组：来自同期本院健康体检儿童共20例(男12例，女8例)，平均年龄5.9(S = 1.5)岁，对照组儿童无特应性疾病及免疫性疾病史。急性发作组、缓解组及对照组三组儿童性别(?字2 = 1.029，P > 0.05、年龄(F = 1.933，P > 0.05)经统计学处理差异无统计学意义，具有可比性。

　　1.2 主要试剂

　　淋巴细胞分离液购自达科为生物技术公司，PBS、RPMI1640培养液、二硫苏木糖醇(DDT)购自威佳公司，胎牛血清购自杭州四季青公司，鼠抗人CD3单克隆抗体(OKT3)、鼠抗人CD28 单克隆抗体(anti-CD28)购自BD/Pharm

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