华支睾吸虫病是由华支睾吸虫囊蚴感染宿主所引起的一种人兽共患寄生虫病。本实验室近年来开展对于华支睾吸虫功能基因组研究，表膜蛋白在疫苗研究中的价值初显[1-3]。我们对华支睾乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase from Clonorchis sinensis，CsLDH)的研究中，发现此酶能表达在华支睾吸虫表膜上，且该酶分子为厌氧代谢的关键酶分子，因而其结构与功能特点使其很有可能成为一个有价值的疫苗候选分子[4-5]。表位是蛋白质抗原性的基础，深入研究蛋白质的表位对蛋白质的结构和新型疫苗分子的设计具有重要价值[6-8]。我们运用Pcgene软件分析获得CsLDH的3个重要的表位：aa10-18，aa12-20和aa94-102。aa10-18和aa12-20为连续的亲水线性表位，遂命名为E10-20;aa94-102则命名为E94-102;理论预测E94-102位于膜外区，三维空间上构成一个抗原结合环，Arg102为CsLDH催化中心中3个必须氨基酸之一。我们推测针对该表位的抗体可能对CsLDH的结构与功能产生影响[4]。作者经人工合成E10-20及E94-102基因序列，将其克隆至pGEX-4T-1载体，使短肽表达在GST蛋白末端，与原核表达的CsLDH进行对比研究，探讨CsLDH结构特征及线性表位对于CsLDH功能的影响。

　　1 材料和方法

　　1.1 材 料

　　大肠杆菌DH5α/DE3、BL21/DE3由本室保存;原核表达载体pGEX-4T-1购自Pharmasis公司，由本实验室常规保存。清洁级雄性SD大鼠由中山大学实验动物中心提供。

　　1.2 试 剂

　　BamHⅠ、XhoⅠ和T4DNA连接酶购自Promega公司;质粒提取和凝胶回收试剂盒为北京赛百盛公司产品;弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂、丙酮酸(pyruvate)、和还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)均为Sigma公司产品;PV

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