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灵芝孢子粉在治疗重症急性胰腺炎方面的作用           
灵芝孢子粉在治疗重症急性胰腺炎方面的作用

【摘要】  [目的]探讨灵芝孢子粉对重症急性胰腺炎(SAP)的治疗作用。[方法]采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠法造成SAP模型;SD大鼠随机分为假手术组、模型组、奥曲肽治疗组、灵芝孢子粉治疗组及灵芝孢子粉奥曲肽联合治疗组;术后分时段观察血清淀粉酶含量的变化,并于给药 7d后处死大鼠,检测血浆内毒素水平,并将胰腺作病理学检查。[结果]SAP时血清淀粉酶含量和血浆内毒素水平均明显升高,胰腺组织损害严重。经治疗发现,灵芝孢子粉与奥曲肽合用效果更好,与其它治疗组相比差异显著(P<0.05)。[结论]灵芝孢子粉对SAP具有一定的治疗作用,为中西医结合治疗SAP增添新方法。

【关键词】  重症急性胰腺炎 灵芝孢子粉 内毒素

重症急性胰腺炎(SAP)是一种严重危害人类健康的疾病,病情凶险,病死率高,为临床常见急腹症之一。在其治疗方面仍以非手术治疗为主,西药和中药各有优势。本研究旨在探讨灵芝孢子粉和奥曲肽合用的效果,以期为临床治疗提供新思路。

  1  材料与方法

  1.1  材料  动物:选择成年SD大鼠70只,雌雄各半,体重为220g~280g,由佳木斯大学动物中心提供。药物与试剂:牛磺胆酸钠,美国Sigma公司;奥曲肽,印度太阳药业有限公司;灵芝孢子粉,上海康舟真菌多糖有限公司;淀粉酶(AMS)测定试剂盒,南京建成生物工程研究所;鲎试剂测试盒:上海伊华临床医学科技公司。主要仪器:多管架自动平衡离心机,长沙湘仪离心机仪器有限公司;760CRT双光束紫外可见分光光度计,上海精密科学仪器有限公司。

  1.2  方法

  1.2.1  动物分组及模型制备  将70只大鼠随机分为五组,每组14只:Ⅰ组为假手术组,Ⅱ组为SAP模型组(简称模型组),Ⅲ组为奥曲肽治疗组(简称奥曲肽组),Ⅳ组为灵芝孢子粉治疗组(简称灵芝组),Ⅴ组为灵芝孢子粉和奥曲肽联合治疗组(简称奥灵联合组)。术前均禁食12h,自由饮水。25%乌拉坦溶液腹腔注射麻醉(4ml/kg)。将其常规备皮、消毒铺巾后,沿腹白线切开入腹,沿十二指肠找到胰腺,确认胆胰管。先将肝门处胆总管暂时结扎,然后在胆胰管开口十二指肠系膜缘对侧肠壁上选一无血管区,用微量注射器(4号针头)穿刺进入胆胰管1cm 左右,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组均以0.1ml/min的速度缓缓推入5%牛磺胆酸钠(ST)0.1ml/100g,推注结束后,拔出注射器轻压穿刺点处持续10min,然后解除肝门处结扎,并确认腹腔无破损;逐层关腹即可。Ⅰ组仅注入生理盐水,剂量和速度同牛磺胆酸钠。

  1.2.2  给药方法  (1)各组动物均于术后即时开始给药;(2)Ⅰ、Ⅱ组仅给予生理盐水1ml/100g灌胃,2次/ d;(3)Ⅲ组除生理盐水1ml/100g灌胃外,腹腔注射奥曲肽10μg/kg,2次/d;(4)Ⅳ组除补充生理盐水外,灵芝孢子粉灌胃2g/kg,2次/d;(5)Ⅴ组在补充生理盐水,腹腔注射奥曲肽的同时,灵芝孢子粉灌胃2g/kg,2次/d。

  1.2.3  血清淀粉酶(AMS)含量的检测  各组大鼠于术后6h、12h、24h分别检测AMS含量。用乙醚将大鼠浅麻醉后,从其眼内眦静脉处取血,装于洁净试管内,3000rpm离心10min,取血清检测。具体操作步骤按淀粉酶测定试剂盒说明书进行。计算公式为:
    
  血清淀粉酶AMS(u/dL)=(空白管吸光度-测定管吸光度)/空白管吸光度×800

  1.2.4  血浆内毒素含量的检测  大鼠断髓后,将其固定放于超净工作台内,充分暴露心脏,直视下用无菌注射器采集心脏血置于无菌肝素化的试管中,500rpm离心5min后,取血浆置于无热源试管中待检,其它操作步骤严格按照说明书进行。按计算公式A=As-(Ab-Abb)求得吸光度A值,再查对内毒素标准曲线求得内毒素含量。

  1.2.5  胰腺组织病理学检查  取出动物胰腺组织,用 10%福尔马林溶液固定,石蜡包埋切片,HE染色后,用光镜观察。

  1.2.6  数据统计分析方法  将各组存活动物的所有实验数据都以 “均数±标准差(x±s)” 表示,应用SPSS10.0 统计学软件,采用两样本t检验和多个处理组间单因素方差分析

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