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木瓜籽提取物的镇咳祛痰活性研究           
木瓜籽提取物的镇咳祛痰活性研究

                       作者:殷金玲 刘淑霞 潘志刚 殷金龙 鞠凤霞

  【摘要】目的:研究木瓜籽乙醇(95%)提取物的镇咳及祛痰作用。方法:采用浓氨水诱咳法观察镇咳作用,采用酚红排泌法观察祛痰作用。结果:木瓜籽提取物能明显抑制氨水所致小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽次数;能显著增加小鼠气管的酚红排泌量,且成明显量效关系。结论:木瓜籽乙醇提取物有明显镇咳及祛痰作用。
  【关键词】木瓜籽 镇咳 祛痰
  
  木瓜籽为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles Speciosa(Sweet)Nakai的干燥成熟种子,主产安徽、山东、浙江、湖北、云南、贵州、四川等地。木瓜属植物,全世界约有5种,我国均产。其中产于安徽省宣城地区的道地药材,称为宣木瓜。木瓜在中医药学中用途广泛,《中医大辞典》、《本草纲目》、《本草拾遗》等著名医著都记载了木瓜具有舒筋活络, 解渴生津、平肝和胃、祛风除湿等功效,能 治疗 腰膝疼痛,脚气水肿,痢疾霍乱,心痛腹痛等疾病,另外,还有镇咳、清暑利尿、解酒祛痰等作用。 现代 药理实验表明,木瓜具有抗肿瘤、保肝、抑菌、镇咳祛痰作用,临床上多用于治疗急性病毒性肝炎。同时,木瓜亦为一种可食瓜果,近年来已利用木瓜果实研制成药品、加工罐头、果脯、果酒、果醋、果汁等保健食品及美容护肤化妆品,同时作为食品添加剂大量使用。木瓜临床效果独特,有重要的 经济 价值及应用前景。但在木瓜果实中占很大比重的木瓜籽的研究应用确并不多。本课题组现已从宣木瓜籽中分离并经过波谱学鉴定出包括有机酸类、三萜类、黄酮类等在内的二十多种化合物。本次实验是通过药 理学 方法,首先研究其镇咳及祛痰作用,筛选木瓜籽中活性部位,为这种可食用性植物深入开发成新药及新的食品添加剂奠定基础。
  
  一、实验材料
  
  1.动物。清洁级昆明种小鼠,体重(22.0±2.0)g,雌雄兼用,由吉林大学动物实验中心提供。
  2.木瓜籽提取液的制备。宣木瓜购自湖北宣城水果批发市场,经吉林大学药学院张静敏教授鉴定为宣木瓜。去果肉,取木瓜籽1kg,用75%的乙醇加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液,除去乙醇以后制成1L的溶液(简称原液),取原液100ml,稀释成500ml(简称稀释液)。
  3.仪器和试剂。盐酸依普拉酮片,上海衡山制药有限公司,批号:070510;氨水,分析纯,国药集团化学试剂有限公司,批号,070102;氯化铵,分析纯,国药集团化学试剂有限公司,批号,060520;722型光栅分光光度计,山东高密彩虹分析仪器有限公司;梅特勒AB135-S十万分之一天平,德国;HH-42快速恒温数显水箱,常州国华电器有限公司;其它试剂购于北京化工。
  4.统计学处理。应用SPSS13.0统计分析软件进行处理,实验数据以均数±标准差(x±s)表示,实验结果进行多变量方差分析及T检验。
  
  二、方法
  
  1.镇咳作用研究。为研究木瓜籽提取物对小鼠镇咳作用的影响,选取昆明种小鼠雌雄各20只,随机分成4组,每组10只。用药组分别灌胃原液和稀释液20ml/kg,对照组灌胃等量生理盐水,阳性组直接用盐酸依普拉酮(20mg/kg)灌胃给药。连续给药3d,末次给药1h后,将每只小鼠分别置于引咳笼中,使小鼠接受饱和氨水的喷雾刺激5s,从喷雾氨水开始计时,以腹肌收缩,张嘴为准,观察和记录小鼠的刺激潜伏期及2min内咳嗽次数。
  2.祛痰作用研究。为研究木瓜籽提取物的祛痰作用,采用酚红气管排泌法。
  (1)酚红标准曲线的绘制。用天平精确城区酚红0.100g,加5%NaHCO 3 溶液至1000ml容量瓶中。分别吸取此酚红溶液0.25,0.5,0.75,1.00,1.25,1.50,1.75,2.00ml于容量瓶中,加水稀释至满刻度,用722分光光度计于546nm波长下测其吸光度,得回归方程x=0.2257+5.3268y,r=0.9990,并绘制标准曲线。
  (2)选取昆明种小鼠雌雄各20只,随机分成4组,每组10只。用药组分别灌胃原液和稀释液20ml/kg,对照组灌胃等量生理盐水,阳性组氯化铵组(2.0g/kg)灌胃给药。每只小鼠灌胃给药30min后,腹腔注射5%酚红生理盐水溶液10ml/kg,30min后脱臼处死,剥离气管周围组织,剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管,放入盛有1ml蒸馏水的试管中,再加入1mol/L NaOH溶液0.1ml,以1ml蒸馏水/0.1ml NaOH溶液为空白,546nm处测量溶液的吸光度(A)。
  
  三、结果
  
  1.镇咳作用
  结果见表1。原液组、稀释组能显著抑制氨水诱发小鼠的咳嗽潜伏期和咳嗽次数,显示其具有镇咳作用,且呈现量效关系。
  

  2.祛痰实验
  结果见表2。由表2可见,原液组及稀释液组的木瓜籽的乙醇提取物均能增加小鼠气管的酚红排泌量,呈现量效关系,原液组效果优于氯化铵阳性对照组,提示木瓜籽具有祛痰作用。
  
  四、讨论
  
  采用抑制氨水诱咳的方法,研究了木瓜籽乙醇提取物的镇咳作用。本实验首次发现了木瓜籽乙醇提取物的镇咳作用,这可能与提取物中的酚苷类成分有关;采用酚红气管排泌法研究了木瓜籽乙醇提取物的祛痰作用,实验表明木瓜籽有祛痰作用,但作用不如镇咳那样显著。可能与提取部位有关,需要进一步活性筛选。
  本文从镇咳祛痰两方面对木瓜籽润肺化痰的功效进行了

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