| 基于发光金纳米粒子荧光增强法测定溶菌酶 |
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ol/L，考察了可能共存的物质对测定的影响。结果表明，以相对荧光强度变化±5%计，共存组分允许存在的浓度见表1。1000倍的维生素C、维生素 B、维生素E；800倍半胱氨酸、高半胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、小牛胸腺DNA、葡萄糖、多巴胺；500倍人血清蛋 白、卵白蛋白、伴白蛋白、卵粘蛋白、血红素、肌红球素；一些重金属离子，如Ni2＋， Cu2＋， Hg2＋， Ag＋，在10倍情况下对体系的荧光有一定的猝灭作用，而同等浓度的高等电点的细胞色素C对体系有明显的增加作用。但它们在实际样品中含量大多较低，一 般不会对测定产生影响。
在最佳条件下，GNPs的荧光强度与溶菌酶的浓度在2×10－7～8×10－6 mol/L范围内呈现良好线性关系。F－F0＝38.223＋151.07CLys（10－6 mol/L），线性相关系数R＝0.996，检出限为3.0×10－8 mol/L。对4.0×10－6 mol/L溶菌酶平行测定6次，标准偏差为2.6%。可见本方法具有较高的分析灵敏度和重现性。
3.6 合成样品和实际样品的测定
采用本法测定了实际蛋清样品中溶菌酶的含量，结果见表2。回收率为97%～104%，溶菌酶含量在46～55 mol/L范围，与文献\基本一致。考虑到溶菌酶在其它一些实际应用体系中可能含有一定的蛋白质及其它共存物质，考察了3种合成样品中溶菌酶的含量（表 3），测定的相对误差均小于
䥺SymbolqB@ 5%，表明本方法适用于其它实际样品中溶菌酶含量的测定。
References
1 Chen Y M, Yu C J, Cheng T L, Tseng W L. Langmuir, 2008, 24（7）： 3654～3660
2 Pellegrino L, Tirelli A . Int. Dairy J., 2000, 10（7）： 435～442
3 Lee Y C, Yang D . Anal.Biochem., 2002, 310（2）：上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] ... 下一页 >> |
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