作者：郭东艳，陈胜发，王明耿

【摘要】  　　目的对太白楤木的提取工艺进行优化研究。方法以总皂苷含量为主要指标,采用正交实验设计优选最佳提取工艺参数。结果最佳提取条件为8倍量70%乙醇提取3次，2 h/次。结论该实验研究可为太白楤木的工业化生产提供实验依据。

【关键词】  太白楤木　正交设计　总皂苷

    太白楤木又名飞天蜈蚣七，分布于我国西部地区，野生资源非常丰富。主要以根皮入药，用于治疗各种肝炎，肝硬化腹水，消渴，跌打损伤及风湿疼痛等症［1］。楤木根皮的主要化学成分为皂苷，可以水解成楤木根皮皂苷元,同时还含鞣质，胆碱和挥发油等。现代药理研究结果表明楤木根皮提取液具有提高鼠的应激能力，抗溃疡、抗肝纤维化、降血糖及降血脂作用［2～6］。本实验以总皂苷为主要考察指标，采用正交实验研究了太白楤木的提取工艺，为太白楤木及其制剂的开发提供实验依据。

　　1  仪器与试药

    紫外分光光度计（UV1120,上海天美科学仪器有限公司），恒温水浴锅（HH-2型，北京科伟永兴仪器有限公司），人参皂苷Re对照品(中国药品生物制品检定所，批号0822-200003)，水(重蒸馏水),其他试剂均为分析纯。

    楤木根皮购于陕西眉县药材公司，经本院王继涛高级实验师鉴定为五加科植物楤木属Aralialinn太白楤木Aralia chinesis L.的根皮。

　　2  方法与结果

　　2.1  楤木根皮的提取工艺研究楤木根皮的主要成分为皂苷类，由于皂苷类成分在乙醇中具有较好的溶解性。根据影响醇提效果的主要因素，采用总皂苷含量和出膏率为主要指标，拟选取乙醇为溶剂，考察乙醇浓度、溶剂用量、提取次数和提取时间4个因素，每个因素设计3个水平，应用L9(34)正交表安排实验。因素水平见表1，正交实验结果见表2。表1  因素水平表（略）

    取太白楤木药材25 g，共取9份，按正交表设计的因素水平进行回流提取，合并提取液，浓缩并定容至100 ml容量瓶中，备用。

　　2.2  总皂苷含量测定

　　2.2.1  对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的人参皂苷Re对照品5.2 mg，加甲醇溶解并定容至10 ml，制成每毫升含人参皂苷Re 0.52 mg的溶液，即得。

　　2.2.2  供试品溶液的制备精密移取提取液1 ml，加水饱和的正丁醇提取3次，20 ml/次，静置，合并正丁醇液，加正丁醇饱和的水洗涤3次，15 ml/次，弃去水洗液，将正丁醇溶液置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解，稀释定容至50 ml，作为供试品溶液。

　　2.2.3  测定波长的选择取人参皂苷Re对照品溶液(0.52 mg/ml)和供试品溶液，经香草醛-高氯酸显色后，在400～900 nm范围内进行光谱扫描，结果对照品溶液与供试品溶液在（550±2）nm处均有最大吸收峰，且峰形一致，阴性对照在相应波长处无吸收，故可选择550 nm作为样品测定波长。

　　2.2.4  标准曲线的制备精密吸取人参皂苷Re对照品溶液（0.52 mg/ml）0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 ml，分别置干燥具塞试管中，水浴挥干溶剂，各加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.4 ml、高氯酸1.6 ml，于60℃恒温水浴中加热15 min，取出，冰水冷却至室温，再分别加醋酸乙酯10 ml，摇匀。以相应的试剂为空白，照分光光度法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录V A），在550 nm波长处测定吸光度。以吸光度A为纵坐标，人参皂苷Re含量C（mg）为横坐标，计算回归方程为：A=2.928 6 C+0.052，相关系数r=0.999 7。结果表明，人参皂苷Re在0.052～0.312 mg的范围内线性关系良好。

　　2.2.5  精密度实验精密吸取供试品溶液2 ml，共5份，依法显色后测定吸光度，结果RSD为1.18%，表明仪器的精密度良好。

　　2.2.6  稳定性实验精密吸取供试品溶液2 ml，依法显色后在0，0.5，1，2 h测定吸光度，结果RSD为2.54%，表明供试品溶液显色后在2 h内稳定。

　　2.2.7  重复性实验精密吸取提取液1 ml，共5份，分别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液。精密吸取供试液0.3 ml，挥去甲醇，精密加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.4 ml，高氯酸1.6 ml，加塞，摇匀，于70℃水浴中加热20 min，取出，冷却至室温后，精密加入醋酸乙酯10 ml，摇匀。以相同试剂为空白，于550 nm处测定吸收度值，结果RSD为2.25%。本方法重复性良好。

　　2.2.8  回收率实验精密吸取提取液1 ml，共6份，各加入人参皂苷Re对照品适量，按照供试品溶液制备方法制备样品液，测定吸收度。结果平均回收率为96.07%，RSD为3.21%。表明本方法回收率良好。

　　2.3  出膏率测定精密吸取上述正交试验的1～9号样品液各25 ml置于干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，置于105℃的烘箱中烘4 h，然后置于含有五氧化二磷的干燥器中干燥3 h，取出，精密称量，计算出膏率。结果见表2。表2  正交实验结果（略）

    综合评分=出膏率×40/30.92%+总皂苷含量×60/12.44%
   
　　从表2正交实验结果可以看出，各因素对综合评分的影响顺序为C>D>A>B，再从各因素水平来看(K值分析)，B、C因素均为K3>K2>K1，A、D因素为K2>K1>K3，其提取条件以A2B3C3D2为佳。考虑到大生产的实际情况，有必要对各因素水平的显著性进行方差分析，结果见表3。表3  方差分析（略）

    从表3方差分析结果结合直观分析，各因素对总皂苷提取量影响顺序为C> D>A>B，最佳工艺为：A2B3C3D2，考虑到实际生产中节约成本的原则，选择工艺为A2B2C3D2，即8倍量70%乙醇提取3次，提取2 h/次。

　　3  结论与讨论

    楤木根皮的主要成分为皂苷类，而皂苷类成分在热水及乙醇中均具有较好的溶解性，在预试验中也曾对水提与70%乙醇提取进行了比较。结果表明，采用乙醇提取较水提皂苷类成分含量较高，且醇提液过滤较为容易，因此确定了太白楤木的基本提取工艺路线为醇提。本实验对醇提的主要影响因素进行考察，确定了提取工艺参数。

【参考文献】
  　　［1］李世全.秦岭巴山天然药物志［M］. 西安：陕西科学技术出版社，1987.

　　［2］高应东，陈 武，熊敏娟，等. 楤木皂苷对大小鼠应激能力的影响［J］. 中国心理卫生杂志，2005，19（2）：109.

　　［3］崔大江，聂丹丽，郅 敏.飞天蜈蚣七对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子β1蛋白表达的影响［J］. 中国中西医结合消化杂志，2003，11（3）:136.

　　［4］崔大江，王志勇，聂丹丽.飞天蜈蚣七对肝纤维化大鼠醛固酮的影响［J］. 中西医结合肝病杂志，2003，13 (3)：157.

　　［5］崔大江，郅敏，聂丹丽，等.飞天蜈蚣七对实验性肝纤维化大鼠胰岛素细胞功能的影响［J］. 成都中医药大学学报，2004，27（l）：19.

　　［6］王德苓，郭建平，王忠壮，等.太白楤木的降血糖及降血脂作用［J］. 北京军区医药， 1996，8（2）：92.