兔角膜碱烧伤后LYVE-1的表达及意义 |
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新西兰大白兔分为两组:左眼制作角膜碱烧伤模型作为实验组,右眼不做手术作为对照组
1.2 动物模型的制备 角膜碱烧伤模型的制作:用5mm圆形滤纸在1N的NaOH溶液中充分浸透,取出滤纸吸取溶液,贴于角膜中央烧灼30秒,移去滤纸后立即用无菌生理盐水冲洗结膜囊,以0.25%氯霉素滴眼。依Hughes分度法为中度碱烧伤模型。
1.3 免疫组化检查 将实验组及对照组术后1天、3天、7天、14天各组分别取6只兔的术眼及空白眼1/3膜(边缘带巩膜组织),浸入10%中性甲醛固定液中固定24小时,酒精梯度脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,免疫组化测定LYVE-1值,阳性结果呈棕黄色背景无色或者淡黄色。
1.4 统计学方法 实验数据用x±s表示,使用SPSS13.0统计软件包,采用方差分析,α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 每个标本做2张切片,每张切片随机取5个不同的高倍视野(×100),计算每个高倍镜视野的平均灰度值(平均灰度值与阳性表达程度成反比关系)。免疫组化阳性结果判定:胞浆内有黄色或棕黄色颗粒即为阳性表达部位。详见表1。
表1 不同时间不同组别大白兔LYVE-1的平均灰度值比较(略)
对照组兔的角膜几乎无明显的LYVE-1表达。实验组LYVE-1于术后第3天出现表达,第7天、第14天表达呈递增趋势,实验组内1天、3天、7天比较,LYVE-1值差异有统计学意义(P<0.01),7天和14天比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组3天、7天、14天LYVE-1表达均显著高于相对应的对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。
3 讨论 眼部碱烧伤时,碱性物质进入眼内可与角膜蛋白结合形成碱化变性蛋白[1]。正常角膜中无血管及淋巴管,以维持角膜的透明性和相对免疫赦免状态。但在角膜受到化学伤、热烧伤、感染、手术和佩戴角膜接触镜后,角膜 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] 下一页 |
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