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安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响           
安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响
限公司生产(批号:20071210),髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性检测试剂盒由南京建成科技有限公司提供(批号:071103),AU5421全自动生化检测仪由日本Olympus公司生产。

  12动物模型制备清洁级SD大鼠90只,雌雄各半,体质量180~220 g,购自广东省医学实验动物中心,合格证号:0031637。在Wichterman[4-5]方法的基础上进行改良,复制腹腔感染型脓毒血症。术前禁食12 h,用100 mg/L水合氯醛按15 mL/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠,常规消毒腹部,在下腹部正中央切口,长约2 cm,打开腹腔寻找盲肠与小肠及大肠交界处,用灭菌4号丝线环形结扎,结扎完毕后仔细检查,保持肠道通路正常。在与肠系膜相对的盲端肠壁浆膜面用9号针头穿刺2次,2个针孔相距约3 mm,第1针孔距盲端约3 mm,同时在第2针孔处放置1条宽2 mm的橡胶引流片,防止伤口愈合,轻轻将肠管放回原处,关闭腹腔,逐层缝合。术后即刻皮下注射生理盐水,补充手术过程中体液的丢失,剂量10 mL/kg。

  13动物分组及给药将90只大鼠随机分为正常对照组(10只)、模型组(20只)和中药低、中、高剂量组(各20只)。取中药临床剂量的10、20、30倍分别作为低、中、高剂量。中药低、中、高剂量组分别于术前05 h和术后6 h按10、20、30 g·kg-1·d-1剂量灌胃安宫牛黄丸。正常对照组和模型组动物灌胃饮用水。观察记录24 h动物死亡率,24 h后各组动物活杀,检测血清及肺组织有关指标的变化。

  14标本的采集和处理无菌状态下腹主动脉采血,用肝素钠抗凝,3 000 r/min离心15 min,取血浆于-20℃保存。无菌状态下取肺组织200 mg,加入18 mL生理盐水在冰浴下匀浆,3 000 r/min离心15 min,取上清液。

 15指标检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)、肌酐(Cr)含量采用全自动生化分析仪测定,肺组织MPO活性检测采用酶学分光光度法。

  16统计学方法采用SPSS 130统计软件包,对计量资料进行t检验和方差分析,计数资料进行χ2检验。

  2结果

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