| 免疫正常Wistar大鼠皮肤型孢子丝菌病的观察 |
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1 材料与方法
1.1 实验菌株及菌悬液制备
经过形态学和分子生物学鉴定的申克孢子丝菌临床分离株SUMS0382(GenBank登录号：FJ011549)分离自一皮肤淋巴管型孢子丝菌病人。参考以往文献[6]，用血球计数板调整菌悬液浓度至孢子数为1 × 108 /mL，内含少量菌丝不计数。
1.2 实验动物及分组
SPF级Wistar 大鼠66只，雌雄各半，体质量90 ～ 100 g，购自南方医科大学实验动物中心，许可证号：SCXK粤2006-0015。将大鼠分为实验组(60只)和对照组(6只)，每组大鼠雌雄各半。
1.3 实验性感染
采用化学脱毛法将大鼠背部约3 cm × 3 cm区域脱毛。100 g/L水合氯醛按体质量3.0 mL/kg腹腔注射麻醉大鼠，选定2个接种部位，分别为：尾根部、右背部，依次用字母A、B代替;采用皮下注射法，用1 mL注射器在实验组接种部位分别注射孢子丝菌悬液0.1 mL，约含1 × 107个孢子。对照组各接种部位分别注射8.5 g/L NaCl溶液。
1.4 检测指标
自接种之日起，每日观察大鼠的活力、体质量，皮损的性质(红斑、丘疹、鳞屑、结节、溃疡、结痂)、数量及大小，观察时间为12周。接种后第2周、4周、8周各取2只发病大鼠及1只对照大鼠，切取A、B部位的皮损或正常组织，每个皮损分为两部分。一部分用40 g/L多聚甲醛溶液固定，石蜡切片，分别行HE和PAS染色，观察皮损的组织病理变化; 另一部分在无菌条件下将剪碎组织，接种于沙氏培养基(sabouraud dextrose agar，SDA)置25 ℃培养。实验结束时，将所有大鼠处死，取出心脏、肝脏及肾脏组织进行真菌培养，检测是否有系统感染。
1.5 统计分析
使用统计软件SPSS 16.0，对所获数据进行配对的两组二分类资料χ2检验，P < 0.05表示具有统计学意义。
2 结 果
2.1 一般情况
和对照组大鼠相比，所有实验组大鼠接种菌悬液后进食、活动及体质 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] 下一页 |
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