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白藜芦醇通过线粒体途径减轻大鼠重症急性胰腺炎肺损伤 |
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| 白藜芦醇通过线粒体途径减轻大鼠重症急性胰腺炎肺损伤 |
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作者：沙焕臣，拉吉姆，马清涌，徐复国，马振华
【摘要】 目的： 探讨白藜芦醇(RES)对实验性重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用及其机制. 方法： 32只成年雄性SD大鼠随机分为假手术(SO)组；SAP组；地塞米松(DEX)组和RES治疗组. 各组大鼠在制模后12 h采集标本. 动脉血气分析检测动脉血氧分压（PaO2）；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清TNFα和IL6含量；透射电镜(TEM)观察肺脏超微结构变化；RTPCR检测凋亡调控基因Bax, Bcl2和Caspase3 mRNA表达；Western Blot检测凋亡调控蛋白Bax，Bcl2，Caspase3和线粒体内细胞色素c(Cyt c)表达. 结果： SO组，SAP组，RES组和DEX组PaO2水平分别为：（108.30±8.24），（76.34±5.18），（97.43±6.02），（92.50±5.97） mmHg，RES组和DEX组PaO2水平明显高于SAP组（P<0.05）. TNFα含量分别为：（12.54±0.75），（95.59±5.61），（61.66±3.33），（50.90±4.62） ng/L，RES组与SAP组相比较，差异有统计学意义（P<0.05）. IL6含量分别为：（9.29±1.75），（55.68±7.24），（32.29±3.98），（42.51±3.3） ng/L，RES组与SAP组相比较，IL6含量明显降低（P<0.05）. HE和TEM镜下观察结果显示，SAP组肺组织明显充血肿胀，并可见大量炎细胞浸润和细胞凋亡，线粒体肿胀明显；RES组肺组织病理损害程度较SAP组减轻；PCR结果显示，SAP组凋亡调控基因Bax, Caspase3 mRNA表达较SO组明显升高，Bcl2 mRNA表达降低，RES组Bcl2 mRNA表达较SAP组升高(P<0.05)，Bax, Caspase3 mRNA表达较SO组明显降低，Western Blot 检测结果与PCR结果一致. 结论： RES可以通过线粒体途径抑制SAP大鼠肺组织细胞凋亡，从而起到改善肺脏损伤的作用.
【关键词】 急性胰腺炎；白藜芦醇；肺损伤
0引言
急性肺损伤(acute lung injury, ALI)是重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）患者常见的早期并发症和主要死亡原因之一［1-2］. 目前对于SAP并发ALI的机制研究主要集中在炎症因子、细胞介质和微循环障碍等方面，认识ALI的发病机制以及如何采取有效措施进行预防和治疗，已成为各国学者竞相研究的热点问题. 有研究［3-4］显示，白藜芦醇（resveratrol, RES）具有治疗大鼠SAP肺损伤的作用. 但是有关RES缓解肺损伤作用机制的研究还少见报道. 本研究在成功建立大鼠SAP模型后，从调控细胞凋亡的线粒体通路入手，观察RES对大鼠肺脏损伤的保护作用以及其作用通路，探讨RES缓解SAP肺损伤的作用机制.
1材料和方法
1.1材料健康成年雄性SD大鼠32只，体质量250~300 g（西安交通大学动物中心提供）；牛磺胆酸钠（美国Sigma公司）；RES（西安奥塞斯生物有限公司）；TNFα，IL6 ELISA检测试剂盒（深圳晶美生物工程有限公司）；PCR试剂盒（大连宝生物工程有限公司）；引物由上海生物工程技术服务有限公司合成；凋亡调控蛋白Bax，Bcl2，Caspase3，细胞色素c（Cytochrome c,Cyt c） mAb（美国Santa Cruz生物技术有限公司）；辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠Ⅱ抗、小鼠抗βactin mAb（北京博奥森生物技术有限公司）；线粒体提取试剂盒（上海杰美生基因医药科技有限公司）；增强化学发光剂 (美国Pierce生物技术有限公司)；透射电镜（日本东芝公司）.
1.2方法
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