| 百合知母汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞的保护作用 |
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死后，放入盛有体积分数75%酒精的玻璃缸内浸泡10 min。在无菌条件下，取出卵巢，剪破卵泡，200目尼龙膜过滤，取900 μL细胞悬液，用04 mg/L台盼蓝溶液100 μL染色，计数活细胞数(拒染)及死细胞数，并观察细胞活率。将3瓶细胞密度分别调至1×106个/mL，每孔加80 μL细胞混悬液，12个复孔，共10板，放入37℃、体积分数5%CO2培养箱内培养。每隔24 h抽取1板加5 mg/L MTT 20 μL，4 h后加DMSO 150 μL，振荡10 min，于490 nm波长处测定光密度(D)值，连续观察10 d内不同时期GC的生长情况，筛选出最适卵巢GC。未测板每隔3 d更换50 μL培养液，继续培养、测定。
142CdCl2刺激液最适浓度取最适卵巢GC，将细胞密度调至1×106个/mL后均匀接种于96孔培养板中，6个复孔，放入37℃、体积分数5%CO2培养箱内培养，第3 d时分别加入终浓度为10、20、40、60、80 μmol/L的CdCl2刺激液，空白对照组含CdCl2 0 μmol/L。继续培养48 h后，采用MTT法观察细胞生长情况，筛选出最适CdCl2刺激液浓度。
15含药血清的制备选取成年期雌性SD大鼠10只，随机分为2组，每组5只。百合知母汤组每次灌胃百合知母汤8 g/kg，每天2次，空白对照组每次灌胃等容积生理盐水。连续给药3 d后禁食12 h，于第4天一次性给予全天剂量，1 h后颈总动脉取血，离心后分离血清，56℃水浴灭活30 min，过滤除菌。
16百合知母汤含药血清对大鼠卵巢GC的影响取最适卵巢GC，将细胞密度调至1×106个/mL后均匀接种于96孔培养板中， 6个复孔，放入37℃、体积分数5%CO2培养箱内培养，预培养72 h后，换液并加入含药血清，依据含药血清浓度由低至高分为5组，使其终浓度分别为体积分数125%、25%、5%、10%、20%。另设对照组：①空白对照组：体积分数10%DMEM培养液，②空白血清组。继续培养48 h后，采用MTT比色法D值，观察含药血清对大鼠卵巢GC的影响。
17百合知母汤含药血清对CdCl2致GC损伤的影响取最适卵巢GC，将细胞密度调至1×106个/mL后均匀接种于96孔培养板中， 6个复孔，放入3 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] 下一页 |
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