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作者：林忠泽，刘东辉，关世侠
【摘要】 【目的】探讨冷浸法提取丹参脂溶性部位的最佳工艺条件。【方法】采用高效液相色谱(HPLC)法为测定方法，以丹参酮ⅡA提取量为指标，考察不同浓度乙醇和粉碎对丹参酮ⅡA提取率的影响，并用正交试验法进一步优选提取条件。【结果】最佳提取工艺条件为采用8倍量体积分数95%乙醇冷浸提取2次(每次3 h)，在这种条件下，可获得较高的丹参酮ⅡA提取率。【结论】此工艺条件简单、稳定，提取率高。
【关键词】 丹参/生产与制备;丹参/化学;丹参酮ⅡA/分析;色谱法，高压液相;正交试验
丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功效[1]。现代医学认为，丹参具有扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量，防止心肌缺血和心肌梗死，加快微循环血流，促进毛细血管网开放，抑制心肌收缩，减少能量消耗，扩张血管，降低胆固醇、血脂，抑制凝血，激活纤溶，稳定红细胞膜，提高缺氧耐受力，增加肝脏血流量，保护肝损伤细胞，抗肝纤维化，抑制中枢神经系统以及消炎抗菌等作用[2]。其脂溶性成分具有抗菌、抗炎、抗氧化等药理作用[3]。目前提取丹参脂溶性成分的方法主要有乙醇回流法和超临界CO2萃取法[4]。丹参酮ⅡA是丹参脂溶性主要成分之一，丹参酮ⅡA对热敏感，在提取制备过程中容易被破坏[5]，超临界CO2萃取法成本较高。冷浸提取法工艺简单，可室温下操作且成本低。本文对冷浸法提取丹参中的脂溶性部位工艺进行系统研究，旨在优选最佳提取工艺条件，现报道如下。
1仪器和试药
LC10AT高效液相色谱仪(日本岛津);SPD10A紫外检测器(日本岛津);N2000工作站;丹参酮ⅡA对照品购自中国药品生物制品检定所(批号：0766200011);丹参购自山东药材市场，鉴定人为广州中医药大学中药学院关世侠副教授;甲醇为色谱纯，购自SIGMA公司;纯水以双蒸法自制。
2方法与结果
21对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品约10 mg，精密称定，置25 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀;精密量取1 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
22色谱条件色谱柱：Kromasil C18柱(250 mm×46 mm);流动相：甲醇—水(体积比为75∶25);流速：1 mL/mim;检测波长：270 nm。在此条件下测定丹参酮ⅡA对照品及丹参提取物。
23标准曲线分别吸取对照溶液25、50、75、100、150、200 μL，注入液相色谱仪。以丹参酮ⅡA进样量(X)对峰面积(Y)进行线性拟合，丹参酮ⅡA回归方程为Y=4×106X，r=0999 4。结果表明：丹参酮ⅡA在0039 2~0313 6 μg范围内线性关系良好。
24溶剂乙醇浓度选择取8份丹参粉末(过3号筛)，每份约03 g，精密称定后将每2份分成1组，分别精密加入10 mL体积分数为65%、75%、85%、95%的乙醇，冷浸5 h，滤过，收集续滤液，精密量取1 mL置10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，分别精密吸取5 μL注入液相色谱仪进行测定。计算药材提取物中丹参酮ⅡA含量：p丹参酮ⅡA=m丹参酮ⅡA(g)/m药材(g)×100%。
表1结果显示，体积分数85%乙醇提取丹参酮ⅡA含量比体积分数95%乙醇提取丹参酮ⅡA含量低125%,故本实验选择体积分数95%乙醇作为提取溶剂。
25粉碎提取试验取同一批丹参药材，一份粉碎(过3号筛)，一份切碎，再分别称取3份，每份50 g，加8倍量体积分数95%乙醇冷浸过夜，滤过，精密吸取1 mL置10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，分别精密吸取5 μL注入液相色谱仪测定。结果见表2。两组间比较无显著性差异(P>005)。所以从节省能源上考虑，丹参药材不必粉碎成粉末，只需切碎后进行投料。
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