2  方法与结果

　　2.1  溶剂对银杏酸荧光强度的影响取银杏酸标准品分别以DMF、甲醇、丙酮、乙醇、正丁醇、甲醇-水（7∶3），乙腈为溶剂配成100 μg/ml进行荧光扫描；实验温度为(25±0.5)℃，激发和发射狭缝为5 nm，激发和发射单色器的扫描速度均为500 nm·min-1。银杏酸标准品在不同溶剂中的激发光谱和发射光谱分别见图1。
   
　　在丙酮溶液中银杏酸荧光特性消失；在DMF溶液中银杏酸发生荧光淬灭；在正丁醇溶液中银杏酸的发射强度很微弱。在其它4种溶液中，银杏酸都出现位于229 nm和279 nm处的两个荧光激发峰，和位于404 nm和552 nm附近的两个荧光发射峰。比较发现甲醇溶液中银杏酸激发荧光性最强。综合考虑银杏酸的激发光谱和发射光谱，选择甲醇溶液为溶剂，激发和发射波长分别为279 nm和404 nm。

　　2.2  pH条件对银杏酸荧光强度的影响以甲醇-水（7∶3）为溶剂，配制100 μg/ml银杏酸标准液，分别在不同pH条件下测定其荧光强度。在pH值2～8之间，使用磷酸盐缓冲体系；在pH值9.00～10.00之间，使用碳酸盐缓冲体系，荧光测定条件同“2.1”项。
   
　　测定了不同pH条件下银杏酸的相对荧光强度，结果发现随着 pH值的增加，银杏酸的荧光强度略有上升，当pH>4时，荧光性超过仪器检测最高值,这与 文献 ［6］报道一致。因此选择在pH 4.0条件下进行荧光测定。

　　2.3  高效液相-荧光法分析干扰物的影响色谱条件：大连Elite Sino Chrom ODS-AP色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；荧光检测器，激发波长279 nm，发射波长404 nm；流动相：甲醇-3％HAC水溶液（92∶8，V/V）；流速1.0 ml/min，柱温40℃。银杏酸标准品的高效液相-荧光色谱图见图2。由图2可见银杏酸标准品的高效液相荧光图上未见荧光杂质，故可直接采用荧光分光光度计直接进行测定。

　　2.4  荧光分光光度法的线性范围和检测限将银杏酸工作液稀释成一系列浓度，按试验方法分别测定在404 nm下的荧光强度，以荧光强度对相应浓度作图，绘制标准曲线。在相同条件下测定样品溶液中银杏酸的荧光强度，通过标准曲线 计算 其含量。
   
　　配制一系列不同浓度银杏酸工作液，按实验方法在激发波长279  nm，发射波长404 nm的条件下，以无水甲醇作为空白，测定银杏酸标准工作溶液的荧光强度，发现银杏酸浓度在0.221～20.31 μg/ml范围内与荧光强度呈现良好的线性关系，其线性回归方程为：Y=44.19X+82.80，相关系数为R2=0.995； 相对标准偏差为2.1%（n=10）。取20份空白液测定其荧光强度，以3倍标准偏差计算其检测限为0.023 5 μg/ml。

　　2.5  准确度与精密度

　　2.5.1  精密度考察取0.1 mg/ml银杏酸溶液1 ml于10 ml容量瓶中，无水甲醇定容，测定其荧光强度，重复5次，得银杏酸溶液的RSD为0.47%（n=5）。

　　2.5.2  准确度考察取0.1 mg/ml银杏酸溶液1 ml于10 ml容量瓶中，无水甲醇定容，测定其荧光强度，重复5次，得银杏酸溶液的RSD为0.75%。本文由中国论文联盟WWW.LWLM.COM收集整理。

　　2.6  样品分析

　　准确称取一定量的银杏酸对照品以甲醇定容，作为样品溶液，分别按本法和 文献 ［3］HPLC-UV分析条件进行检测，结果见表1。可见荧光分光法与HPLC法测定结果基本一致，因此可以采用荧光光度法进行样品中银杏酸含量的分析。表1  采用荧光光度法与高效液相色谱法测定银杏酸结果的比较（略）

　　2.7  银杏酸光、热稳定性准确移取银杏酸工作液15 ml于具塞比色管中，密封后分别置于5，25，40，70℃恒温，每间隔24 h取样，测定银杏酸的含量，求出分解率。每处理设置3个平行。
   
　　准确移取银杏酸工作液20 ml置于直径为9 cm的石英比色皿中，封口后将石英比色皿放置在阳光下照射（每天8 h，夜间或阴天将比色皿保存于冰箱）；一份表面皿用铝箔遮盖，并放置在阴暗处对比。每间隔24 h定时取样，测定银杏酸的含量，求出分解率。光照实验在距离地面15 m的楼顶平台进行，光照时候保持石英比色试管与太阳光线成30。角，测定光强为35 000～65 000 Lx，黑暗对照以铝箔包裹同样条件下光照，每处理设置3个平行。
   
　　银杏酸置于5，25，40，70℃恒温水浴锅中分别恒温1，2，3，4，5，6 d后，银杏酸的浓度变化见图3～4。

　　由图3 可见,银杏酸在5℃时稳定,浓度不发生变化；温度升至25℃以上，随着处理时间的延长，浓度略有下降，温度越高，银杏酸浓度降低越多，说明高温对银杏酸的稳定性有较大影响；由图4可见，在太阳光照射下，银杏酸的浓度随照射时间的延长而降低。说明银杏酸具有热、光的不稳定性。

　 　3  结论
   
　　本法具

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