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合用组，n=17），模型组（n=18）. 卡托普利以2 g/L浓度溶于动物饮水中，自由饮水；氯沙坦以20 mg/kg灌胃，每日晨1次. 共干预2 wk. 术后第5，10日尾套法测定各组大鼠血压.
1.2.3血流动力学检测100 g/L水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，分离右颈动脉，插入颈动脉插管，并经换能器连接至生理分析仪，待动脉压力波形稳定后，选取6个压力周期波形，由分析系统自动计算主动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP). 继续将颈动脉插管推进到左心室，待心室内压力波形稳定后，选取6个心动周期，计算左室收缩压（LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室内压最大收缩和舒张速率(±dp/dt).
1.2.4左心室容积测量及病理切片的制备静脉注入100 g/L氯化钾使心脏于舒张期停跳，迅速取出心脏，置于100 g/L冰氯化钾溶液中，使心脏舒张均一. 持续以100 g/L中性甲醛以13 mm水柱压力灌注左心室40 min，再将整个心脏浸入100 g/L中性甲醛固定12 h. 去除右心室、心房及大血管，用1 mL注射器直接测量心脏容积. 从心脏中部垂直于心脏长轴横切左心室，取心尖部分石蜡包埋，自心底部向心尖部每隔1 mm切取10 μm切片，行HE染色. 另在心脏中部切面切5 μm切片行免疫组化分析.
1.2.5梗死面积和扩张指数测定［4］扫描左心室横截面切片，使用彩色病理图像分析系统测量各弧长、周长、面积和厚度. 按照公式计算梗死面积，以瘢痕弧长百分数表示. 梗死面积（%）＝瘢痕弧长/［(外周长+内周长)/2］×100%. 选扩张最明显的截面（中截面）测量扩张指数. 扩张指数=(左心室腔面积/左心室总面积)×(间隔厚度/瘢痕厚度).
1.2.6免疫组化检测切片常规脱蜡，经30 g/L过氧化氢孵育10 min,山羊血清室温下孵育20 min后分别加入兔抗鼠Ⅰ型胶原抗体和αactin mAb，4℃冰箱过夜,依次滴加羊抗兔IgG二抗，SABC液37℃孵育30 min，DAB显色试剂盒显色8 min,苏木素复染,脱水透明,中性树胶封片. 彩色病理图像分析系统进行分析. 统计分析中不包括血管自身胶原成分. 每张切片任意选5个视野进行统计分析,求得平均值.
1.2.7RTPCR检测梗死区Ⅰ,Ⅲ型胶原水平术后2 wk取心脏，分离梗死瘢痕区组织，使用Trizol(50～100 g/L组织)提取总RNA，反转录PCR法检测胶原a1(Ⅰ)和a1(Ⅲ)的表达，琼脂糖凝胶电泳后扫描DNA条带灰度，以collagenα1(Ⅰ)和collagenα1(Ⅲ)与GAPDH的比值作为半定量指标. collagenα1（Ⅰ）sense：5′AAGAGGCGAGAGAGGTTTCC3′; antisense: 5′ATCACCAGGTTCACCTTTCG3′；产物长度318 bp；collagenα1（Ⅲ）sense：5′GCCTTCTACACCTGCTCCTG3′; antisense: 5′GATCCAGGATGTCCAGAGGA3′；产物长度386 bp；GAPDH sense：5′TGGAAAGCTGTGGCGTGATG3′；antisense：5′TCCACCACCCTGTTGCTGTAGC3′，产物长度359 bp. 以HO1与GAPDH的比值作为半定量指标.
统计学处理：数据以x±s表示，使用SPSS11.5统计软件进行方差分析和t检验. P<0.05为差异具有统计学意义.
2结果
2.1血流动力学改变结果显示，假手术大鼠无明显心肌梗死，无死亡. 卡托普利组、合用组、模型组各存活12，12，11只大鼠，心肌梗死面积为35.6%～49.4％，各组大鼠心肌梗死面积差异无统计学意义（P>0.05）. 心肌梗死大鼠各血流动力学参数显著劣于假手术组. 卡托普利组与合用组血流动力学参数较模型组显著改善；合用组收缩压/舒张压低于卡托普利组，左心室舒张末压有较卡托普利组增高的趋势（P=0.08），左室内压最大收缩和舒张速率差异无统计学意义（P>0.05，表1）.表1合用卡托普利和氯沙坦与单用卡托普利对AMI大鼠血流动力学影响 上一页 [1] [2] [3] [4] 下一页 |
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