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度后，将诱导剂二磷酸腺苷（ADP）2μmol(1μmol/mL)加入PRP中，记录浊度改变曲线及最大聚集率（pMA/%）。
144TXB2、6ketoPGF1α及血小板GMP140含量测定取清洁级SD大鼠50只，雌雄各半，分组及给药方法同141，每组10只。末次给药后05h后，按002mL/kg剂量腹腔内注射20mg/L戊巴比妥钠麻醉，心脏穿刺取血2mL，用消炎痛乙二胺四乙酸二钠（EDTANa2）抗凝备检，以3 000r/min离心10min，分离血浆，严格按试剂盒说明书步骤操作，采用放射免疫法测定TXB2和6ketoPGF1α含量，采用酶联免疫吸附（ELISA）
双抗体夹心法测定GMP140含量。
145组织型纤溶酶原激活剂（tPA）及其抑制剂（PAI1）水平测定取清洁级SD大鼠50只，雌雄各半，分组及给药方法同141，每组10只。末次给药后1h，以30mg/L戊巴比妥钠10mL/kg腹腔注射麻醉，背位固定，心脏穿刺取血2mL，用EDTANa2抗凝备检，3 500r/min离心15min，分离血浆，采用ELISA法检测tPA、PAI1水平。
146凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血活酶时间（APTT）测定取清洁级SD大鼠50只，雌雄各半，分组及给药方法同141，每组10只。末次给药后1h,以30mg/L戊巴比妥钠10mL/kg腹腔注射麻醉，背位固定，心脏穿刺取血18mL，38mg/L枸椽酸钠（与血液容积比为1∶9）抗凝，以3 000r/min离心10min分离血浆后，在全自动血凝分析仪上检测PT和APTT值。
15统计学方法采用SPSS 130统计软件进行统计分析。 2结果
21各组对小鼠出、凝血时间及血小板计数的影响表1结果显示，大黄炭高、中、低剂量组和云南白药组均能缩短小鼠出、凝血时间，与空白对照组比较有显著性差异（P＜001）；与云南白药组比较，大黄炭高剂量组作用显著（P＜005）。各给药组均能显著提高小鼠血小板计数（P＜005），其中大黄炭高、中剂量组作用显著（P＜001）；与云南白药组比较，大黄炭高剂量组可显著提高小鼠血小板计数（P＜005）。
22各组对大鼠血小板聚集性及TXB2、6ketoPGF1α、GMP140含量的影响表2结果显示，各给药组均能显著提高血小板最大聚集率及TXB2、GMP140含量（P＜005或P＜001），显著降低6ketoPGF1α含量（P＜005或P＜001），大黄炭低、中、高剂量作用呈现一定的剂量效应关系，且大黄炭高剂量组除GMP140含量外，作用均优于云南白药组（P＜005）。
23各组对大鼠PT、APTT和tPA、PIA1活性的影响表3结果显示，各给药组均可显著缩短大鼠PT、APTT（P＜001）,且大黄炭中、高剂量组缩短PT的作用优于云南白药组（P＜005），但大黄炭各剂量组对tPA及PAI1活性无显著影响（P＞005）。
表1各组对小鼠出、凝血时间及血小板计数的影响表2各组对大鼠血小板凝集性及TXB2、6ketoPGF1α、GMP140含量的影响
3讨论
大黄止血最早文献记载于汉代张仲景《伤寒论》，临床运用于各种血证，故有“血证要药”之称。《血证论》中亦云：“大黄一味，既是气药，又是血药，止血而不留瘀，尤为妙药。”大黄有效止血成分单体d儿茶素和没食子酸为阐述大黄止血功能提供了物质依据［4］。根据中药“烧炭存性”的原理［5］，我们在采用现代超微粉碎技术与传统炮制技术相结合的基础上研制新型中药制剂，该药物采用超微粉碎仪将大黄炭粉碎过200目筛制成微米中药，使其在保持原有药性的基础上又最大限度地提高药物的吸收和生物利用度，同时缩短了药物的起效时间。凝血时间可反映内源性凝血途径凝血因子的活性，活化部分凝血活酶时间的测定亦是用于检测对内源性凝血途径的影响，涉及因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ等多种凝血因子的功能，而凝血酶原时间测定主要用于检测外源 上一页 [1] [2] [3] [4] 下一页 |
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