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【摘要】 【目的】观察复方茯苓甘草汤对肺动脉高压（PAH）大鼠肺动脉转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响，以探讨该方防治肺动脉高压、肺血管重构的作用机理。【方法】选用30只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、复方茯苓甘草汤治疗组(中药组，剂量为546g·kg-1·d-1)；腹腔内一次性注射野百合碱（剂量为50mg/kg）造模，采用右心导管法检测大鼠平均肺动脉压(pmPA)；计算右心肥厚指数(p右心肥厚)；采用病理图像分析系统计量肺小动脉形态学指标，免疫组化法观察肺动脉中TGFβ1的表达。【结果】模型组大鼠pmPA、p右心肥厚显著升高，肌型动脉及部分肌型动脉比例增多，肌型动脉中膜面积与管腔面积比值（AM/AL）增大，肺动脉TGFβ1表达明显增多;复方茯苓甘草汤组上述各指标均有显著改善。【结论】复方茯苓甘草汤可有效降低肺动脉压、改善肺血管重构，其机理可能与抑制肺动脉TGFβ1的表达有关。
【关键词】 复方茯苓甘草汤/药理学；肺动脉高压/中药疗法；肺血管构型重建/中药疗法；肺组织/病理学；转化生长因子β;疾病模型，动物；大鼠
肺动脉高压(PAH)是临床众多心肺血管疾病发生发展的重要病理生理环节，在肺心病的发展过程中起着重要作用，长期肺动脉高压可致右心肥厚甚或功能衰竭。肺血管构型重建（PVSR）以肺血管壁细胞增殖，细胞外基质（ECM）合成增多，腺泡内无肌型动脉肌化、管壁增厚、管腔狭窄为主要特征，是造成肺血管阻力持续升高和肺动脉高压发生发展的主要原因［1-2］。转化生长因子β(TGFβ)是一组多功能的多肽类生长因子，对细胞的增殖与分化、细胞外基质的产生、血管的生成、细胞凋亡及机体免疫系统均起着重要的调节作用［3］。我们既往的实验［4］表明复方茯苓甘草汤能降低肺动脉压，但机制仍不甚明了。本文观察了复方茯苓甘草汤对PAH大鼠肺动脉TGFβ1表达的影响，以探讨该方防治PAH、PVSR的作用机理，现报道如下。
1材料与方法
11药物复方茯苓甘草汤（茯苓、桂枝、炙甘草、桃仁、川贝母等）药材均购于广东医学院附属医院中药房，按组方比例称取，常规煎煮后配制成含生药546g/L药液。
12主要仪器及试剂Leiea Q500IW图像分析系统（德国Leica公司）；MedlabE生物信号采集处理系统（南京美易科技有限公司）；野百合碱（MCT，美国Sigma公司）；TGFβ1多克隆抗体（北京天来生物医学科技有限公司）；免疫组化试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。
13实验动物及分组SPF级SpragueDawley系健康雄性大鼠30只，体质量(260±20)g，由广东医学院实验动物中心提供，合格证号：粤监证字2007A034。随机分为正常对照组(不造模，第2天开始给予生理盐水10mL/kg灌胃，每天1次，连续21d)、模型组(造模后第2天开始给予生理盐水10mL/kg灌胃，每天1次，连续21d)及复方茯苓甘草汤治疗组(中药组，造模后第2天开始给予中药546g·kg-1·d-1灌胃，连续21d)。
14肺动脉高压模型复制［5］MCT用乙醇和生理盐水(体积比为2∶8)混合液配成10mg/L溶液，按50mg/kg腹腔内一次性注射。正常对照组注射等容积生理盐水代替MCT。
15肺动脉压力及右心肥厚指数测定［6］借助右心导管与MedlabE生物信号系统测量平均肺动脉压(pmPA)；取出心脏，剪除心房及血管，分离左、右心室及室间隔，冰盐水冼净及滤纸吸干后分别称量右心室自由壁质量(mRV)和左心室加室间隔质量(mLV+S)，计算右心肥厚指数p右心肥厚=mRV/mLV+S。
16肺血管形态学指标的观测剪取完整右肺上叶，冰盐水洗净，除去血液，滤纸吸干，体积分数为10%中性甲醛溶液固定24h，常规梯度脱水、浸蜡、包埋、5μm连续切片、烤干，行苏木素—伊红（HE）及弹性纤维染色。显微镜下观察并计数整张切片中直径约30~200μm的肺血管肌型动脉(MA)、部分肌型动脉(PMA)、无肌型动脉(NMA)的数目，分别计算它们各占肺血管总数的百分比；每张切片随机选直径约30~200μm范围的肌型动脉各 [1] [2] [3] 下一页 |
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