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【摘要】 目的: 研究核因子（NFκB）在1甲基4苯基1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中的影响和对环氧合酶2(COX2)的表达调控作用以及人参皂甙Rg1对其的影响，探讨导致多巴胺(DA)能神经元变性失活的可能机制. 方法: 采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,用免疫组织化学法和免疫蛋白印迹法观察小鼠黑质区酪氨酸羟化酶(TH),COX2，前列腺素E2（prostaglandine2，PGE2）以及NFκB的表达变化；并观察给予人参皂甙Rg1对上述变化的影响. 结果: 与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现典型PD症状,在MPTP第5次注射后24 h，黑质区NFκB（34.6±5.6），COX2（28.2±5.1）, PGE2(36.1±4.2)阳性细胞较对照组NFκB（2.5±0.8），COX2（1.0±0.3）, PGE2(3.2±0.4)阳性细胞显著增加(P<0.01), TH阳性神经元显著丢失60%(P<0.01)；经人参皂甙Rg1处理后,模型组小鼠PD症状减轻,与模型组比较,黑质区NFκB（4.9±2.1），COX2 （1.9±0.7）,PGE2(4.6±0.3)阳性细胞明显减少(P<0.01)，TH阳性细胞数较对照组仅下降32%. 结论: 核因子NFκB在亚急性PD模型早期对黑质COX2表达中可能起重要调控作用；人参皂甙Rg1可能影响NFκB及C0X2表达而对小鼠多巴胺神经元起一定保护作用.
【关键词】 帕金森病；炎症；环氧合酶2；前列腺素E2；核因子NFκB；人参皂甙Rg1
0引言
帕金森病(parkinsons disease，PD)是一种常见的中枢神经系统变性疾病. 有研究［1］认为,炎症可能在PD发病过程中起重要作用, 环氧合酶2(cyclooxygenase2，COX2)及其介导的炎症反应可能参与PD发病过程［2］. 核因子(nuclear factorκappaB, NFκB)在炎症反应过程中发挥重要作用，近期的研究显示NFκB的激活与PD发病有关［3］. 但有关NFκB是否参与PD模型中COX2表达调控的报道少见. 本研究采用1甲基4苯基1,2,3,6四氢吡啶（1methyl4phenyl1, 2, 3, 6tetrahydropyridine,MPTP）制备亚急性PD模型,观察模型动物中脑黑质NFκB和COX2及其产物前列腺素E2（prostaglandine2，PGE2）表达与小鼠黑质区酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase，TH)阳性神经元数量关系及给予人参皂甙Rg1后对上述变化的影响,探讨NFκB在PD发病过程中的分子机制，为探索PD有效防治措施提供线索.
1材料和方法
1.1材料健康雄性C57BL/6N小鼠45只，8~12 wk龄，体质量25~30 g［北京维通利华实验动物技术有限公司SCXX(京)20020003］,小鼠均自由进食饮水,室温（25±2）℃，单笼喂养，自然光照. MPTP(美国Sigma公司)；兔抗人PGE2 mAb(美国Cayman公司)；小鼠抗人TH mAb(美国Chemicon公司)；人参皂甙Rg1（吉林大学基础医学院化学教研中心）；兔抗人COX2 mAb,兔抗人NFκB（p50）多克隆抗体, 浓缩型免疫组织化学超敏UltraSensitiveTMSP试剂盒(福州迈新生物).
1.2方法
1.2.1动物分组和模型制备实验随机将小鼠分为3组，每组15只. 模型组(PD组)：给予MPTP 30 mg/kg,盐水溶，腹腔注射,1次/d,连续5 d. 人参皂甙Rg1干预组 (Rg1组)：除给予PD组相同的MPTP处理外,MPTP注射前3 d定时给予人参皂甙Rg1 10 mg/kg,盐水溶，腹腔注射，并在MPTP注射前2 h注射人参皂甙Rg1. 溶剂组（对照组）：注射与PD组和Rg1组等体积的盐水. 上述动物均于MPTP第5次注射后24 h处死. 于每次注射药物后观察小鼠是否出现静止震颤、肌肉僵直、运动迟缓等PD行为学表现, 判断 [1] [2] [3] [4] 下一页 |
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