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广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究           
广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究
伤组织,+ 差,++ 一般,+++ 较好,++++ 旺盛

  212不同浓度BA对愈伤组织诱导的影响

  以广藿香带节茎为材料,设置不同浓度的BA(0、01、02、05mg/L)与05mg/LNAA配合使用,诱导愈伤组织,统计接种15d后的愈伤组织诱导率和生长势,比较不同BA浓度对愈伤组织诱导的影响。结果表明,不添加植物激素或单独使用细胞分裂素BA未能产生愈伤组织,适当浓度的BA和NAA配合,则能较好地诱导出愈伤组织,BA的适宜浓度为:02~05mg/L,其中,浓度为02mg/L时,愈伤组织的生长势最好。

  213不同外植体诱导愈伤组织能力的差异

  将广藿香试管苗的4种不同外植体:叶片、带节茎、不带节茎及根尖,接种至MT+ 02mg/LBA +05mg/LNAA培养基中,观察不同外植体诱导愈伤组织能力的差异。结果表明:一般接种15d后4种外植体均能产生愈伤组织,愈伤组织诱导率均达100%。但不同外植体诱导的愈伤组织生长势表现明显的差异。带节茎诱导的愈伤组织生长势旺盛,愈伤组织黄白色,疏松;不带节茎诱导的愈伤组织生长势较好,愈伤组织黄白色,疏松;叶片诱导的愈伤组织生长势一般,颜色为浅绿色,致密;根诱导的愈伤组织生长势较差,愈伤组织灰白色,硬脆。在愈伤组织的分化实验中还观察到,叶片诱导的愈伤组织在短时间内分化出大量的芽;带节茎和不带节茎诱导的愈伤组织分化出芽的时间较晚,培养一段时间后可获得量较多的愈伤组织;根诱导的愈伤组织不分化出芽,培养时间超过30d后即出现褐化现象。

  22愈伤组织的增殖

  广藿香外植体培养能成功诱导出愈伤组织,但由于原代培养获得的愈伤组织的量较少,为了能够在较短的时间内获得较多的愈伤组织,以便能分化出更多的再生植株,因而设置了愈伤组织增殖试验。

  221不同植物激素对愈伤组织增

殖的影响

  将带节茎接种于MT+02mg/LBA +05mg/LNAA培养基中诱导愈伤组织,30d后取愈伤组织为材料,接种至以下4种培养基中:MT+ 02mg/LBA、MT+ 002mg/LTDZ、MT+005mg/L 24D及MT+02mg/LBA +05mg/LNAA,观察愈伤组织的增殖情况。表2结果表明,愈伤组织在只含有BA或TDZ的培养基中难以生长,愈伤组织呈浅绿色,质地致密;在含有24D的培养基能部分增殖,愈伤组织灰白色,质地疏松;在同时含有BA和NAA的培养基中生长良好,增殖较快,愈伤组织白色,质地疏松。可见,24D、BA和NAA的配合使用均能较好地促进愈伤组织增殖,但后期的分化试验结果表明,在含24D培养基上增殖的愈伤组织难以分化,因此,BA和NAA配合使用,较有利于广藿香愈伤组织的增殖。表2不同植物激素对愈伤组织增殖的影响(略)

  222愈伤组织培养时间对增殖的影响

  将广藿香带节茎接种于MT+02mg/LBA +05mg/LNAA培养基中诱导愈伤组织,分别于30d和60d以后取愈伤组织为材料,接种至同样成分的新鲜培养基中。30d的愈伤组织在新培养基中能继续生长,增殖较多,同时,培养20~25d后有少量愈伤组织于原培养基上分化出芽;60d的愈伤组织在新培养基上难以生长,较之30d的愈伤组织增殖明显较少,愈伤组织为灰白色,培养30d后,愈伤组织颜色变褐,且未见分化现象。可见,愈伤组织培养时间的长短,直接影响其细胞增生的能力,随着愈伤组织培养天数的增加,逐渐出现老化现象,活力降低,易于褐化,难以继续培养。

  23愈伤组织的分化

  将获得的广藿香愈伤组织转至分化培养基,能成功诱导出芽(图1-b,彩图见第200页),在愈伤组织分化试验中可观察不同植物激素对分化的影响以及不同外植体诱导愈伤组织分化能力的差异。

  231不同植物激素对愈伤组织分化的影响

  以带节茎为材料,接种至MT+02mg/LBA +05mg/LNAA培养基中诱导愈伤组织, 30d后转接至分化培养基。从表3中可知,愈伤组织在各种培养基中的分化情况有所不同,在不含激素的MT培养基中,15d后愈伤组织分化率为3333%,分化的芽少,小芽部分出现玻璃化,且叶片发黄;在含KT、TDZ或IAA的培养基中,愈伤组织15d后的分化率为42%~52%,其分化芽的情况较为相似,小芽数目较多,芽的质量较好;在含BA的培养基中,愈伤组织的分化率最高,15d后达8095%,与MT培养基中的愈伤组织分化率比较有显著性差异

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