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广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究           
广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究
(P<005),且分化出的芽数多,芽的质量好,生长较旺盛;在含有24D的培养基中,愈伤组织的分化率最低,仅953%的愈伤组织分化出芽,且大多芽玻璃化。结果表明,在多种激素中,BA有利于愈伤组织的分化,其分化率最高,分化出的芽数亦较多,且生长良好。表3不同植物激素对愈伤组织分化的影响(略)

  232不同外植体诱导的愈伤组织分化能力的差异

  将广藿香试管苗的4种不同外植体叶片、带节茎、不带节茎及根尖,接种至MT+02mg/LBA +05mg/LNAA培养基中诱导愈伤组织,30d后将愈伤组织转接至分化培养基MT+ 02mg/LBA中,统计愈伤组织培养15d后的分化率。从表4可以看出,叶片诱导的愈伤组织分化率最高,达100%,分化出大量的芽;带节茎和不带节茎诱导的愈伤组织分化率分别为8667%和8333%;根尖诱导的愈伤组织不分化。结果表明,叶片、带节茎和不带节茎诱导的愈伤组织均能较好地分化出芽,根诱导的愈伤组织难以分化。表4不同外植体诱导的愈伤组织分化能力的差异(略)

  24无根苗诱导生根及移栽

  将获得的再生苗接种至生根培养基中,接种10d后开始生根,15d时生根率达100%(图1-c,彩图见第200页)。长出的根生长旺盛,植株生长良好。待试管苗生长至6~7cm长时,挑选健康的试管苗进行驯化炼苗,让幼苗适应外界的自然环境,然后移栽到露天种植,成活率达到90%以上(图1-d,彩图见第200页)。

  3讨论

  广藿香外植体诱导愈伤组织,再经体胚发生再生植株的研究,已有成功的报道,张家明等[5]以广藿香的叶片为外植体诱导愈伤组织,研究了广藿香愈伤组织的悬浮培养,获得了大量的试管苗。肖省娥等[6]采用广藿香的叶片及带节茎诱导愈伤组织,获得了再生植株。现有的研究主要是以叶片和带节茎为材料,且对于影响愈伤组织诱导及分化的因素缺乏系统的研究,同时有关愈伤组织增殖方面的研究还未见报道。本试验以叶片、带节茎、不带节茎及根尖为材料,系统地研究了影响愈伤组织诱导及分化的因素,同时考察了不同因素对愈伤组织增殖的影响,结果表明,取带节茎或不带节茎接种于含BA和NAA的培养基中较易诱导出愈伤组织。同时,BA和NAA配合使用能较好地促进愈伤组织的增殖。培养天数为30d的愈伤组织具有较强的增殖和分化能力。在愈伤组织的分化实验中,BA有利于愈伤组织的分化;叶片诱导的愈伤组织分化能力较强。通过本实验,我们建立了广藿香高效的愈伤组织诱导和分化再生植株的体系。大多数的高等植物的各种器官,离体后在适当的环境下都能产生愈伤组织[7]。愈伤组织是指植物局部创伤后或在组织培养中,当已分化的细胞恢复了细胞分裂能力,而增殖形成的无组织结构、无器官分化的薄壁细胞团。在植物组织培养中,愈伤组织可由外植体诱导产生,在一定条件下,可再分化出具一定结构及功能的器官,如根、茎、胚状体或重新形成完整的植株。研究表明,植物离体培养中通过器官发生和体细胞胚胎发生再生植株,通常被认为是单细胞起源的[8]。因此,广藿香离体器官经遗传转化或诱变试验处理后,再经愈伤组织诱导再生的植株,由

于是单细胞起源的,可避免嵌合体的产生,从而可能为新品种选育提供有价值的种质材料。

【参考文献】
    [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2005:30.

  [2]文衍堂.海南岛广藿香、沙姜青枯病病原菌的鉴定[J].热带作物学报,1984,5(2):113.

  [3]卢同.我国作物细菌性青枯菌的研究发展[J].福建农业学报,1998,13(2):33.

  [4]李薇,徐鸿华.广藿香规范化栽培技术[M].广州:广东科技出版社,2003:35-38.

  [5]张家明,郑学勤,孙雪飘.广藿香体细胞培养植株再生的研究[J].热带作物学报,1994,15(1):73.

  [6]肖省娥,贺红,徐鸿华.广藿香组织培养与植株再生研究[J].中药材,2001,24(6):391.

  [7]李浚明.植物组织培养教程[M].北京:中国农业大学出版社,2002:39,26.

  [8]Swartz HJ. Postculture behavior: genetic and epigenetic effects and related problems. In: Debergh P C,Zimmerman R H. Micropropagation

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