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【摘要】 目的  研究PI-103对耐药白血病细胞的效果及其机制。方法  四甲基偶氮唑蓝(MTT)法研究PI-103对K562及K562/A02细胞增殖的影响,流式细胞术研究细胞内阿霉素浓度的改变。结果  PI-103能显著抑制两种细胞株的生长,对敏感和耐药白血病细胞株具有相同的抑制效果;PI-103能显著增加细胞内阿霉素的浓度,与阿霉素联用时,能增加阿霉素对细胞的生长抑制作用,但仅有叠加效应而无协同效应。结论  PI-103对于耐药白血病是一种有良好应用前景的药物。 本文由中国论文联盟医学院第一附属 医院 血液病研究所传代保存。培养基为含10%胎牛血清的RPMI1640(Gibco公司产品),置37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱中培养,K562/A02长期以2μg/ml阿霉素(ADM)加压培养,在实验前2周撤除阿霉素。取对数生长期的细胞进行实验。PI-103购自美国cayman公司。
        1.2MTT法测定细胞增殖:取对数生长期细胞,调整细胞浓度,以1×105个细胞/ml的终浓度接种于96孔培养板,加入不同浓度药物,空白对照组以培养基补足,每孔总体系0.2ml,CO2孵箱内培养24小时(h),加MTT工作液20μl/孔(美国Sigma公司),置CO2培养箱中孵育4h,1000 rpm/min离心,小心吸去上清,加入二甲基亚砜0.2ml/孔,吹打,使紫蓝色甲臜沉淀充分溶解。在酶标仪570nm波长处读取吸光度值(A)。以时间为横轴,A值为纵轴,绘制细胞生长曲线。实验重复三次,设复孔三个,取平均值为最终结果。按下列公式 计算 细胞增殖率:
        细胞生存率=(A处理组-A空白组)/(A对照组-A空白组)*100%
        细胞生长抑制率=1-细胞生存率
        1.3流式细胞术测

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