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血清GADA、ICA、IAA、IA2A的测定在糖尿病分型中的应用及诊断价值           
血清GADA、ICA、IAA、IA2A的测定在糖尿病分型中的应用及诊断价值

                         作者:茅华英,金文君,王笑颜

【摘要】  :[目的]探讨糖尿病自身抗体对糖尿病分型的诊断价值。[方法]实验分为3组,1型糖尿病(T1DM)组、2型糖尿病(T2DM)组、正常对照组。采用免疫印迹试剂法对糖尿病自身抗体GADA、ICA、IAA、IA2A进行分析。[结果]GADA、ICA、IAA、IA2A在T1DM组中检出率分别为65.33%、38.00%、24.67%、10.67%,在T2DM组分别为17.27%、13.69%、12.50%、5.95%,以及正常对照组中为0.00%、1.00%、0.00%、2.00%。T1DM和T2DM与正常对照组比较均有显著性差异P<0.05;T1DM与T2DM比较其阳性率明显高于T2DM,P<0.05,GADA最易检出。[结论]GADA、ICA、IAA、IA2A的测定对糖尿病的诊断和分型有重要的临床意义;联合检测能提高阳性率,避免漏诊。

【关键词】  糖尿病;谷氨酸脱羧酶抗体;胰岛细胞抗体;胰岛素抗体;酪氨酸磷酸酶样蛋白质分子抗体

  Abstract:[Objective] To explore the diagnostic value of diabetes autoantibody in grouping diabetes.[Method]The experiment has 3 groups: diabetes I(T1DM)group,diabetes II(T2DM)and normal control group.Take western blotting reagent mehtod to analyse diabetes antibody GADA,ICA,IAA and IA2A.[Result] The relevance ratios of 4 items of antibody in T1DM are respectively65.33%,38.00%,24.67%,10.67%;17.27%,13.69%,12.50%,5.95% in T2DM;0.00%,1.00%,0.00%,2.00% in normal control group.There’s marked difference between T1DM,T2DM and normal control group,P<0.05;the positive rate in T1DM is much more than T2DM,P<0.05;GADA is easiest checked out.[Conclusion] The measurement of GADA,ICA,IAA and IA2A has main clinical meaning in diagnosis and grouping of diabetes;combined test can improve positive rate,avoiding leak diagnosis.

  Key words: diabetes;GADA;ICA;IAA;IA2A

    糖尿病(diabetes)是一种因胰岛素分泌绝对或相对不足而引起的以高糖血症为主要特征的代谢性疾病。按照1997年ADA及1999年WHO关于DM分类及诊断建议标准,DM主要分为T1DM和T2DM,糖尿病患者血清中可检出多种胰岛抗体,其中GADA、ICA、IAA、IA2A的检测可用来诊断糖尿病和不同类型的糖尿病。本文分别对T1DM和T2DM及健康人检测了GADA、ICA、IAA、IA2A,探讨糖尿病自身抗体对T1DM的诊断和与T2DM的鉴别价值,及时对糖尿病做出早期诊断及分型,对改善患者生存质量和预后十分重要。

  1  研究对象

    本实验收集了2007年10月至2008年9月湖州市中心医院内分泌科住院并确诊的糖尿病患者。T1DM和T2DM诊断及分类按世界卫生组织(1999年)标准。T1DM组150例,女70例,男80例,年龄4~48岁,平均年龄(26.27±9.98)岁,均为初发典型急性起病,明显酮症发生趋向的患者。T2DM组168例初诊病例,女78例,男90例,年龄17~83岁,平均(49.73±14.72)岁,排除继发性糖尿病、妊娠糖尿病。正常对照组为本院2008年健康体检者100例,女46例,男54例,年龄20~65岁,平均年龄(37.49±9.50)岁,排除心、脑、肝、肾等慢性疾病及内分泌疾患,无糖尿病家族史。3组性别构成无差别。

  2  研究指标和方法

  2.1  标本采集

  所有受检人员均早晨空腹静脉采非抗凝血2ml,血清分离后,-20℃以下冻存待测。测定方法:GADA、ICA、IAA、IA2A均应用伯劳特生物制剂有限公司生产的糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒检测,严格按照说明书操作。

  2.2 统计学方法 

  采用SPSS10.0统计软件包进行数据处理,各参数以x±s表示,计数资料采用x2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

  3  结果

  3.1  T1DM和T2DM组与对照组GADA、ICA、IAA、IA2A检测阳性率比较(见表1)表1  T1DM、T2DM组和对照组GADA、ICA、IAA、IA2A检测阳性率比较[例(略)]

    结果显示: T1DM和T2DM组GADA、ICA、IAA、IA2A抗体检测均显著高于对照组P<0.05。在T1DM组,GADA分别和ICA、IAA、IA2A比较,四种抗体的阳性率依次为GADA>ICA>IAA>IA2A,单一抗体最高阳性率与多个抗体最高阳性率比较,P<0.05。
 
  3.2  T1DM和T2DM组GADA、ICA、IAA、IA2A检测阳性率比较

  (见表2)结果显示:T1DM组GADA、ICA、IAA、IA2A抗体检测明显高于T2DM组,P<0.05。表2  T1DM和T2DM组GADA、ICA、IAA、IA2A检测阳性率比较[例(略)]

  4 讨论

    T1DM是因为胰岛β细胞自身免疫破坏所致,其自身免疫特性表现为患者外周血中存在多种针对胰岛β细胞自身抗体。谷氨酸脱羧酶(GAD)是将谷氨酸转化成抑制神经递质r氨基丁酸(GABA)的限速酶,其抗体(GADA)是T1DM最早出现的抗体。有研究发现GADA阳性在一定程度上反应β细胞损害程度较重[1]。在患者出现T1DM临床表现前数年甚至数十年就可出现,在初发T1DM患者血中阳性率可达60%~80%[2],而在T2DM和正常人血液中的阳性率很低。本文T1DM组GADA阳性率为65.33%与T2DM组的17.27%有显著差异,说明GADA在T1DM的诊断与T2DM的鉴别方面有重要意义。胰岛细胞抗体(ICA)是一种存在于患者血清中的免疫球蛋白,对胰岛细胞的胞桨成分产生细胞毒效应,为特异性抗体,但它随着病程延长,阳性率下降很快,目前认为ICA阳性预示β细胞的自身免疫损害,只作为糖尿病的高危指标,在儿童阳性或高水平持续阳性时,对T1DM才具有较高的预测性。胰岛素抗体(IAA)是一组与胰岛素结合的抗体,它绝大多数与胰岛素结合,形成抗原抗体复合物而失去生物活性,因此,它为T1DM治疗提供重要依据,也是评价药用胰岛素的理想指标。本文T1DM组IAA阳性率24.67%显著高于T2DM组12.50%(P<0.05)。

    酪氨酸磷酸酶样蛋白质分子抗体(IA2A)是由979个氨基酸组成的I型跨膜黏蛋白,代表胰岛素β细胞特异性免疫。近年来研究表明,IA2A与GADA联合检测在筛查自身免疫中介1型糖尿病中有一定意义[3]。本文IA2A的阳性率虽然没有GADA高,但据临床观察,部分IA2A阳性而GADA阴性的患者仍为典型的T1DM,说明两抗体出现的情况并不完全重叠,联合检测有助于提高检出率。

    在本文和报道的研究中,T1DM和T2DM患者GADA阳性率明显高于ICA、IAA、IA2A,可见GADA的预测价值优于ICA、IAA、IA2A。Tuomilehto认为GADA预测T1DM的特异性为100%,敏感性为82%,是糖尿病分型的重要指标。任何单一抗体的检测,由于方法的局限和这些抗体在T1DM患者中出现情况、时间和强度不一致,难免会出现假阴性,造成漏诊。本研究表明,GADA、ICA、IAA、IA2A联合检测明显高于任何单一抗体的检测(P<0.05),联合检测具有互补性,可以提高实验室的诊断率,对于糖尿病及时、准确的分型具有重要的意义。还可作为T1DM高危人群流行病学的筛选指标[4]。

【参考文献】
    [1]邢万架,张胜兰.1型DMHLADPBI DQBI基因与其自身抗体相关性研究[J].中华内分泌代谢杂志,2001,17(6):338340.

  [2]朱禧星.现代糖尿病学[M].上海:上海医科大学出版社,2000:195.

  [3]张如根,项坤三,潘晓平.IA2抗体及GAD抗体联合检测筛查自身免疫中介1型糖尿病[J].上海医学,2001,24:214216.

  [4]欧阳玲莉,周智广,彭健,等.胰岛素自身抗体在诊断I型糖尿病的价值[J].中华内分泌杂志,2004,20(3):232233.

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