尿毒清胶囊人含药血清抑制尿毒症毒素血清刺激的肾小管上皮细胞2增殖与转分化作用观察


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尿毒清胶囊人含药血清抑制尿毒症毒素血清刺激的肾小管上皮细胞2增殖与转分化作用观察

尿毒清胶囊人含药血清抑制尿毒症毒素血清刺激的肾小管上皮细胞2增殖与转分化作用观察

/ L多聚甲醛固定20 min，1 000 r/min，离心5 min，去上清，加5 μL一抗αSMA小鼠抗人单克隆抗体1∶100, 37 ℃孵育30 min ，PBS冲洗，1 000 r/min，离心5 min，滴加FITC羊抗鼠IgG二抗，浓度1∶100，37℃避光孵育30 min，PBS冲洗后，每管加PBS 05 mL上机。FCM在氢激光光源，激发波长为488 nm，变异系数小于2%条件下测试分析，每管分析105个细胞，联机专用软件处理，计算出各时相细胞的比例、细胞增殖指数[4] 。增殖指数IP=[(pS+pG2/M) /(pG0/G1+pS+pG2/M)]×100%。注：pS指细胞周期的DNA合成期细胞数，pG2/M指DNA合成后期至有丝分裂期的细胞数，pG0/G1指静止期至DNA合成前期的细胞数，从流式细胞仪中直接读出的是各期细胞占总细胞(pG0/G1+pS+pG2/M)的百分比]及αSMA阳性细胞百分率。PBS代替一抗或二抗作为阴性对照。

　　17统计学方法采用SPSS 115软件进行统计，采用单因素方差分析(OneWay ANOVA)进行处理，每两个均数间的比较根据方差齐性检验(HomogeneityofVariance)，当总体方差齐时选择Bonferroni法，当方差不齐时选择Tamhanes T 2法。

　　2结果

　　21尿毒清胶囊含药血清对人HK2周期和增殖的影响

　　211流式细胞仪检测结果表1结果显示，5%、10%尿毒症血清组G0/G1期细胞百分数显著降低(均P<001)，IP显著升高(均P<001)。5%、10%含药血清组及蒙诺组可显著升高pG0/G1，降低IP(均P<001)。

　　212MTT法检测结果表2结果显示，5%尿毒症血清组、10%尿毒症血清组D值均显著高于正常对照组(P<001)，但两组间差异无显著性意义(P>005)。5%含药血清组D值显著低于10%尿毒症血清组(P<001)，10%含药血清组和蒙诺组D值显著低于5%、10%尿毒症血清组(均P<001)。

　　22尿毒清胶囊含药血清对HK2 αSMA

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