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作者：王亮,吴昌英, 刘桦 ,张涛
【摘要】 目的 研究一种快速准确的分析壳寡糖组成的定性测定方法。方法 通过连续电泳和不连续电泳对比实验确定壳寡糖的最佳分析条件。结果 浓缩胶浓度为3%，分离胶浓度为17.5%，上样量为10 μl，恒定电流为40 mA，电泳时间50 min条件下，获得最佳壳寡糖分析图谱。 结论 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析壳寡糖组成的方法的确是一种简单快速有效地定性检测方法。
【关键词】 壳寡糖； 电泳分析； 聚丙烯酰胺凝胶电泳
【Abstract】 Objective To explore a qualitative, fast and accurate way for analyzing composition of chitooligosaccharide . Methods By consecutive electrophoresis and nonconsecutive electrophoresis experiments, the best analysis conditions of chitooligosaccharide were determined. Results The concentration of plastic was 3 percent, the concentration of separation of plastic was 17.5 percent, the volume of samples was 10 μl, constant current was 40 mA ,electrophoresis time was 50 min. Best analysis photos of chitooligosaccharide Can be obtained under those conditions. Conclusion The method of analyzing composition of chitooligosaccharide is truly a simple,effective, accurate and qualitative way.
【Key words】 chitooligosaccharide；electrophoretic analysis；polyacrylamide gel electrophoresis
壳寡糖是壳聚糖经水解制得的产物，是D葡萄糖胺通过β(14)糖苷键连接的吡喃葡萄糖键合而成的2～10个单元的低聚糖。文献报道［13］，壳寡糖具有促进脾脏抗体生成、抑制肿瘤生长等生理功能，在食品和日化用品方面也有着广泛的应用。一般壳寡糖的检测多采用薄层层析和高效液相色谱法。对于薄层层析法，虽然价格低廉，但是操作时间长，无法定量，而高效液相色谱法，效果好，但是它需要大型的仪器且流动相，花费昂贵，对于一般的实验室来说初期筛选是不利的。所以需要一种简便快捷低廉检验壳寡糖的方法。本研究使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测寡糖，快速、简便，弥补了传统检测方法的缺点，具有较好的应用和推广价值。
1 实验部分
1.1 仪器和试剂
寡糖(Sigma)，盐酸氨基葡萄糖（中国医药集团上海试剂公司），壳聚糖（脱乙酰度≧90%，上海伯奥生物科技有限公司），蜗牛酶（Lvshengyuan Biotechnology公司）,硼氢化腈钠（Fluka），其余试剂均为国产分析纯。
冷冻干燥机(Thermo公司),高速冷冻离心机（Eppendorf公司），pH计(成都方舟科技开发公司),10kD超滤管(Milli [1] [2] [3] 下一页 |
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