实验分组与给药方法 健康Wistar大白鼠63只(购自四川大学实验动物中心),雌雄不拘,体重170±20 g,室温20±2 ℃.随机分为对照组、实验1组、实验2组。每组21只,各分出7只作为观察术后皮瓣成活情况的对象,另外14只分2批作远端皮瓣组织MDA指标检测用。
采取大鼠腹腔注射给药,盐酸川芎嗪注射液为山西康意制药有限公司生产(批号:070509,规格:2 ml(40 mg)/支);对照组予生理盐水4 mg·kg-1/d,实验1组(低剂量实验组)盐酸川芎嗪注射液剂量为20 mg·kg-1/d,实验2组(高剂量实验组)药物剂量为80 mg·kg-1/d,各组均于术后即刻第1次给药,每日分2次给药,至术后第7 d.
1.2 动物模型制备
术前2 d以8%硫化钠脱背部毛,备皮范围约3 cm×8 cm,
手术前夜,实验动物禁饮食,术前腹腔内注射4 ml/kg 1%硫喷妥钠注射液,麻醉成功后俯卧位固定,鼠背中线为皮瓣纵轴,设计以鼠肩胛骨下缘处为蒂,长宽分别为:7 cm、2 cm,皮瓣在内膜深面和深筋膜浅面掀起,按照有关文献处理[4],使皮瓣成为任意型皮瓣,30丝线原位缝合;距蒂部4 cm以远为远端皮瓣。
1.3 观察指标
1.3.1 皮瓣成活率 术后7 d,麻醉动物,美蓝描画皮瓣范围及坏死部位,以硫酸纸临描,以不同颜色区分坏死与成活区域,扫描后,利用计算机全自动图像分析系统求出皮瓣成活面积与总面积之比,即皮瓣成活率。
1.3.2 皮瓣远端组织匀浆MDA含量 各组均于任意皮瓣形成后2 h、72 h取远端皮瓣组织,参照晏泽等的实验方法制成匀浆后测定MDA含量[5]。测定试剂盒购于北京莱博生物实验材料研究所。MDA以硫代巴比妥酸法测定。MDA与硫代巴比妥酸结合后形成红色产物,在532 nm处测定标本吸光度A值,参照标准品A值以换算出标本MDA含量。
1.4 统计学方法
所有数据均采用均数±标准差表示,使用SPSS软件12.0版本,采用方差分析。 2 结果
2.1 皮瓣成活率
术后7 d,对照组皮瓣成活率为47.74%±6.35%,实验1组为49.38%±8.64%,实验2组为62.44%±7.21%;实验2组与对照组、实验2组与实验1组间差异均有统计学意义(P<0.05),而实验1组与对照组间差异无统计学意义。
2.2 皮瓣远端组织匀浆MDA含量
皮瓣形成术后2 h、72 h,实验2组大鼠任意皮瓣远端组织匀浆MDA含量均低于对照组及实验1组,而对照组与实验1组间差异无统计学意义(见表1)。表1 大鼠任意皮瓣远端组织MDA含量的变化注:与对照组比较: a ﹡P<0.05;与实验1组比较: b P<0.05。
3 讨论
任意皮瓣在掀起后其远端组织在低灌流状态下常常发生局部缺氧。在此过程中,氧自由基增多直至局部氧化还原态失衡,并通过一系列的氧化反应使得细胞产生功能和结构改变,造成组织损伤。因此,研究氧自由基损伤对于任意皮瓣存活的影响具有重要意义。MDA是氧自由基作用下的过氧化产物,可间接反映出细胞受损程度,所以测定皮瓣远端MDA含量可反映皮瓣缺血后局部组织的损伤情况。
川芎嗪可有效清除氧自由基,在一些缺血再灌注损伤的研究中表现出积极的干预作用,并且认为其能够增加组织内源性超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,减轻毛细血管内皮 上一页 [1] [2] [3] 下一页 |