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苦瓜蛋白对K562/A02耐药逆转作用的研究           
苦瓜蛋白对K562/A02耐药逆转作用的研究

                作者:尹丽慧,叶爱芳,熊术道,韩义香,章圣辉,吴建波

【摘要】  :[目的]观察苦瓜蛋白对K562/A02细胞多药耐药的逆转及对Pgp 表达、功能的影响。[方法]采用CCK8法测IC50,用流式细胞仪测定苦瓜蛋白对K562/A02细胞上Pgp 表达及细胞内ADM潴留的影响。[结果]苦瓜蛋白能提高K562/A02对多种化疗药物敏感性,使Pgp蛋白表达下降,提高细胞内ADM的浓度。[结论]苦瓜蛋白能部分逆转K562/A02的耐药性,逆转机制与下调Pgp蛋白的表达有关。

【关键词】  白血病;苦瓜蛋白;多药耐药;P糖蛋白

  Abstract:[Objective] To explore effect of momordin on reversion of multidrug resistance (MDR) in K562/A02 cells, and expression and function of Pglycoprotein (Pgp ). [Methods] IC50 was detected by CCK8, and expression of Pgp and retention of ADM in K562/A02 cells were detected by flow cytometry (FCM). [Results] Momordin can improve sensitivity of K562/A02 cells to many kinds of chemotherapeutical drugs, result in decrease of expression of Pgp, and raise concentration of ADM within cells. [Conclusion] Momordin can partly reverse drug resistance of K562/A02 cells, the mechanism of reversion is related with down regulation of expression of Pgp.

  Key words: leukemia; momordin; multidrug resistance; Pglycoprotein

    白血病细胞对化疗药物产生多药耐药(MDR)是临床上白血病患者化疗失败和复发的主要原因,而多药耐药基因(MDR1)编码的细胞膜糖蛋白P170过度表达,导致细胞毒药物从肿瘤细胞内外渗,使肿瘤细胞内药物浓度下降是MDR最常见,最主要的发生机制。因此,通过采用对Pgp的调节,抑制其过度表达,从而使肿瘤的MDR发生逆转或部分逆转,将对临床肿瘤患者的治疗有非常积极的意义。苦瓜蛋白是从苦瓜种子中分离出来的一种碱性蛋白,属于I型核糖体失活蛋白,研究表明,其能显著抑制肿瘤生长,诱导肿瘤细胞凋亡,具有较强的抗肿瘤作用[12],但目前有关苦瓜蛋白逆转MDR的研究国内外少有报道,本研究观察其对K562/A02细胞耐药性的影响,期望为白血病MDR治疗寻找一种新的药物。

  1  材料

  1.1  细胞株 K562 上海中科院细胞库;K562/A02 中国医学科学院血液学研究所。苦瓜蛋白是本实验室提取[3],RPMI1640 美国 GIBCO公司;胎牛血清天津市正江高科技有限公司;100 青霉素链霉素双抗液 美国GIBCO公司;阿霉素和柔红霉素 浙江海正药业股份有限公司;长春新碱 广州明兴制药有限公司;柔红霉素 浙江海正药业股份有限公司;CCK8 日本同仁化学研究所;荧光标记单抗 BD公司。

  1.2 方法

  1.2.1 细胞培养 

  人红白血病细胞株K562及耐药株K562/A02用含10%FBS,100U青、链霉素的RPMI1640培养液,37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,长满后按悬浮细胞常规传代法进行传代培养。

  1.2.2 

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