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附子对慢性充血性心力衰竭模型大鼠NO、TNFα水平的影响           
附子对慢性充血性心力衰竭模型大鼠NO、TNFα水平的影响

【摘要】  [目的]探讨附子抗心力衰竭的疗效及作用机制。[方法]用SD大鼠50只,随机分正常、空白对照组(简称Ⅰ号组)、模型组(简称Ⅱ号组)、地高辛组(简称Ⅲ号组)、附子水煎剂低剂量组(简称Ⅳ号组)、附子水煎剂高剂量组(简称Ⅴ号组)。除正常对照组外均采用尾静脉注射盐酸阿霉素(ADR)损伤大鼠心肌致心力衰竭。各组分别用药治疗后,测定大鼠血清中TNFα、NO水平,并应用光镜观察心肌组织的理变化。[结果]与正常对照组比较,心衰模型组大鼠血清中TNFα、NO水平升高;与心衰模型组比较,使用地高辛能显著降低心衰模型大鼠血清中TNFα、NO水平,差异显著(P<0.01);而附子水煎剂高剂量、附子水煎剂低剂量则可轻度降低心衰模型大鼠血清中TNFα、NO水平,两组无明显差异(P>0.05),但这两组跟地高辛组差异显著(P<0.01)。光镜结果显示附子水煎剂高剂量组、附子水煎剂低剂量组心肌细胞损伤度均轻于心衰模型组,而地高辛组心肌细胞损伤度明显轻于心衰模型组。[结论]附子高、低剂量组能轻微改善心功能、减轻心衰症状,调节神经内分泌细胞因子水平,必要时应复方使用,方能收到满意的疗效。

【关键词】  附子 慢性充血性心力衰竭 NO TNFα SD大鼠

慢性充血性心力衰竭(CHF)也称慢性心力衰竭,是大多数心血管疾病的最终归宿,也是最主要的死亡原因。近年来用附子单味药治疗多种原因引起的心力衰竭的研究较少,本实验旨在复制CHF动物模型,从细胞因子水平探讨附子水煎剂对实验性CHF大鼠的作用机制,为临床CHF的综合治疗提供理论和实验依据。

  1  实验材料

  1.1  药物  附子水煎剂高剂量组、附子水煎剂低剂量组。按传统方法水煎,药液浓缩成100%,即每毫升含生药0.1g,4℃ 冰箱贮存备用;盐酸阿霉素(ADR),山西普德药业有限公司生产,批号20070603;地高辛,广东邦民制药有限公司生产,批号060921,用蒸馏水稀释成0.2mg/ml,灭菌后备用。

  1.2  实验动物  WISTAR大鼠50只,雌雄各半,体重250~300g,由重庆第四军医大学动物所提供。

  1.3  主要试剂  一氧化氮(NO)试剂盒由上海贝西公司提供、(肿瘤坏死因子)TNFα试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供。

  1.4  主要实验仪器及设备  哺乳类动物手术器械(手术刀、组织剪、有齿镊、止血钳、12号灌胃针、5ml注射器、4号头皮针等)高速低温冷冻离心仪(中国科技大学实业总公司中佳光学仪器公司)、低温冰箱、电子秤(湖南仪器仪表总厂天平厂)。

  2  实验方法

  2.1  动物分组及造模  取60只SD大鼠适应性喂养3d后,随机取10只(雌雄各半)作为Ⅰ号组(空白对照组)。尾静脉注射等体积生理盐水,给药容积同盐酸阿霉素。余50只大鼠用阿霉素造模,每kg/次/大鼠用4mg,每5天注射1次,共3次。末次ADR给药24h后,随机选取模型鼠2只,断头处死,取出心脏,用预冷0.9%生理盐水冲洗,取左室心肌部分,以10%甲醛固定,HE染色,光镜下观察确认造模成功后,再将所余大鼠随机分为Ⅱ号组(心衰模型对照组)、Ⅲ号组(地高辛治疗组)、Ⅳ号组(附子水煎剂低剂量组)、Ⅴ号组(附子水煎剂高剂量组)。各组均精饲料喂养,自由饮水。

  2.2  给药方法  Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组造模后次日开始灌胃给药,连续给药21d,附子水煎剂低剂量组1~2 ml/kg,、附子水煎剂高剂量组4~6ml/kg,地高辛按1.6mg/kg进行,Ⅰ、Ⅱ组则以7~10ml/kg的生理盐水灌胃。

  2.3  观察项目及检测方法

  2.3.1  症状观察  观期间,察大鼠活动度、呼吸、发绀程度、毛发光泽、水肿、死亡等。

  2.3.2  生化检验及病理学检查  灌药后第15天,股静脉取血,处理后分别用化学法及放免法测定各组大鼠血浆中NO、血清TNFα的水平,具体步骤按试剂盒说明书方法进行。最后放血处死大鼠,取左室心肌部分,以10% 甲醛固定,常规石蜡包埋,病理切片,HE染色,光镜观察。
2.4  统计方法&nbs

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