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硬膜外应用虎纹镇痛肽I对自体神经移植大鼠脊髓背角cfos表达的影响 |
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| 硬膜外应用虎纹镇痛肽I对自体神经移植大鼠脊髓背角cfos表达的影响 |
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10聚乙烯管插入硬膜外腔，插入深度为7 cm，到达脊髓腰膨大水平。在管的中段预先用封口膜缠一小结球以确定插入深度，缝合小球固定在颈背肌，通过留在外面的PE10进行给药[3]。B组观察1周后，三组大鼠行坐骨神经自体神经移植模型制备。1%硫喷妥钠5～7 mg/kg腹腔注射麻醉后，大鼠俯卧，右股后外侧纵行切口，自肌间隙进入，分离出右侧坐骨神经，于坐骨神经中段、胫神经和腓总神经分叉近端操作。A组及B组分离出右侧坐骨神经后于坐骨神经中段，胫神经和腓总神经分叉近端切取神经10 mm，即用9/0无创伤缝线显微镜下行原位神经移植；C组坐骨神经仅于空气中暴露5 min后，还复至原位，术毕逐层关闭切口。所有手术操作均在SXP1型显微镜（上海医用光学仪器厂生产）下进行。术后常规注射青霉素抗炎治疗，分笼饲养。B组模型制备术后6 h起每天硬膜外给予HWAPI 50 μg/kg，持续1周。
1.2 机械痛阈测试
模型制备术后27 d起，进行不同强度的Von Frey丝痛阈测试，每3 d测定1次，每组每次随机挑选5只大鼠，由患肢2、3跖趾间皮肤敏感处进行测试，每根Von Frey丝重复5次，每次间隔2 s，出现3次以上的缩爪反应，记为该足1次机械痛阈值。各大鼠左右足轮流测试，每足测试5次，各取其平均值，为其机械痛阈值。术前各组均测定机械痛阈值。
1.3 cfos检测
各组大鼠术后27 d起每6 d检测，每组测痛剩余大鼠中随机挑选5只大鼠，患侧足底均给予轻柔触摸刺激，3 h后予腹腔注射1%硫喷妥钠10～15 mg/kg深麻醉后，心脏灌注生理盐水，再以4%多聚甲醛300 mL心内灌注固定。取脊髓L4～L6节段，置于相同固定液中固定24 h，石蜡包埋、切片，以免疫组织化学SP法检测cfos表达。显微镜下观察fos阳性反应性神经原个数。每只大鼠取5张fos蛋白表达最多的切片，对术侧脊髓背角I～II层fos蛋白阳性表达细胞进行计数统计。
1.4 统计学处理
用SPSS 11.0软件进行统计分析，所有计量资料采用均数±标准差(±s)表示，组间 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] 下一页 |
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