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环孢素A、维拉帕米、川芎嗪对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901/ADR逆转作用的研究 |
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环孢素A、维拉帕米、川芎嗪对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901/ADR逆转作用的研究 |
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孔,培养48小时,加入20μL(5.0g/L)MTT,4小时后加入DMSO 150μL,摇床摇匀,以酶标仪490nm波长测定各孔吸光度(A值)。计算不同浓度下细胞的存活率[3][SR=(实验组A值/对照组A值)×100%]、半数抑制浓度IC50及相对耐药性[4](RF=耐药细胞株IC50/胃癌细胞株IC50)。
1.3.3 确定CsA、VP、TMP的非细胞毒性剂量 方法同上,以SGC-7901细胞和SGC-7901/ADR细胞为靶细胞。设空白对照组、阴性对照组、CsA组(1.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L、4.0mg/L、5.0mg/L)、VP组(5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、40.0mg/L、80.0mg/L)、TMP组(100.0mg/L、200.0mg/L、300.0mg/L、400.0mg/L、500.0mg/L),计算细胞在不同药物浓度下的SR。
1.3.4 观察CsA、VP、TMP的逆转作用 采用MTT法,在SGC-7901细胞和SGC-7901/ADR细胞中加不同浓度5-FU(10.0μg/L~105μg/L)、不同浓度5-FU(10.0μg/L~105μg/L)+非细胞毒性剂量的“逆转剂”,计算药物的IC50及逆转倍数RI(RI=单独用药IC50/联合逆转剂后IC50)。
1.3.5 统计学处理 采用SPSS11.5统计软件包进行回归分析、t检验及方差分析,P<0.05认为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 确定SGC-7901/ADR细胞对5-FU的耐药性 SGC-7901/ADR细胞对5-FU具有耐药性,相对耐药性(RF)为97.49,见表1。
表1 不同细胞对5-FU IC50的影响(略)
2.2 确定CsA、VP、TMP的非细胞毒性剂量 在MTT实验中,当SGC-7901/ADR细胞存活率SR≥95%[5]时,确定为本实验采用的非细胞毒性剂量,即CsA在3.0mg/L、VP在10.0mg/ 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] 下一页 |
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