大鼠CD36基因真核表达载体的构建及表达


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大鼠CD36基因真核表达载体的构建及表达

大鼠CD36基因真核表达载体的构建及表达

别是TGFβ1, 被认为是关键的致纤维化因子, 是迄今发现的最强的细胞外基质沉积促进剂［4］。而其他细胞因子, 如IFNγ、 IL1、 IL7、 IL4及IL13等, 只是通过促进或抑制TGFβ1的信号转导, 来调控胶原蛋白的产生［5-7］。目前已清楚, 只有活化形式的TGFβ1才能与其受体结合发挥致纤维化作用, 而其在体内首先以潜在非活化的潜在TGFβ1（latent TGFβ1, LTGFβ1）形式分泌。这种LTGFβ1是由潜在联系多肽（latencyassociated peptide, LAP）和TGFβ1组成的蛋白复合物, 该复合物不能结合TGFβ1受体并激活下游信号。CD36作为TSP1的受体, 在TGFβ1活化过程中的发挥重要作用。首先LTGFβ1中的LAP与TSP1 Ⅰ型重复序列上TSR1和TSR2之间的KRFK氨基酸序列特异结合, 形成TSP1/LTGFβ1蛋白复合物, 当该蛋白复合物再通过TSP1分子中TSR2和TSR3基序中CSVTCG氨基酸序列与CD36外功能区第93110位YRVRFLAKENVTQDAEDN氨基酸序列特异结合而发生空间构象变化, 邻近的纤溶酶才能作用于该蛋白复合物使TGFβ1与LAP发生分离, 从而产生活化的TGFβ1［8, 9］。

　　本研究成功地构建大鼠CD36真核表达载体, 并转染至293T细胞, 通过荧光显微镜观察和Western blot方法检测其在293T细胞的胞膜上表达, 为进一步实验奠定实验基础。

【参考文献】
　　［1］ Ge Y, Elghetany MT. CD36: a multiligand molecule［J］. Lab Hematol, 2005, 11(1): 31-37.

　　［2］ Bonniaud P, Margetts PJ, Ask K, et al. TGFβand Smad3 signaling link inflammation to chronic fibrogenesis［J］. J Immunol, 2005, 175(8): 5390-

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