申克孢子丝菌属于双相型真菌，在自然界或室温培养为菌丝相，在体内或37 ℃培养为酵母相。申克孢子丝菌感染可导致孢子丝菌病，不仅可以引起皮肤组织的病变，还可侵犯内脏器官引起系统性病变，严重危害着人类的健康[1-2]。酵母相是申克孢子丝菌的致病相，申克孢子丝菌在体内从菌丝相到酵母相的转化是致病的一个关键步骤[3-4]。目前关于酵母相转化的研究多集中在基因水平[5-6]，而对于与致病性同样紧密相关的生化特点研究较少。本文研究了不同温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验菌株

　　菌株SUMS0382、SUMS0383、BMU02035和BMU00471经形态学和分子生物学鉴定为申克孢子丝菌。SUMS0382和SUMS0383分离自我科淋巴管型孢子丝菌病患者，BMU02035和BMU00471由北京大学真菌和真菌病研究中心惠赠，亦分离自孢子丝菌病患者。

　　1.2 培养基

　　沙堡弱琼脂(Sabouraud?蒺s agar， SDA)基、马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar， PDA)基、脑心浸汁琼脂(brain heart infusion agar， BHI)基、含50 mg/kg去纤维蛋白羊血清的脑心浸汁琼脂基(brain heart infusion agar plus 50 mg/kg goat blood， 50 mg/kg羊血BHI)及含5 mg/kg葡萄糖脑心浸汁琼脂基(brain heart infusion agar plus 5 mg/kg Glucose， 5 mg/kg GSBHI)，pH值均为7.0，购自广州市迪景微生物技术有限公司。

　　1.3 菌株活化

　　将实验菌株接种于 PDA 斜面培养基上，在含体积分数为5%的CO2 25 ℃恒温箱中培养，每隔7 d传代1次，连续传代2次，光镜下检查菌落形态，以保证菌株的纯度和生长活力。

　　1.4 酵母相转化

　　于超净工作台内，采用划线接种法将每株菌分别接种于SDA、PDA、BHI、50 mg/k

上一页  [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] 下一页