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温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用研究           
温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用研究
时低于35 ℃和37 ℃,其内在机制在进一步研究中。

  本研究发现,35 ℃和37 ℃是申克孢子丝菌酵母相转化的适宜温度,与以往的研究相符[7]。在35 ℃和37 ℃,无论是发生转化的菌株数量还是酵母细胞的转化率,均明显高于36 ℃和38 ℃。但35 ℃和37 ℃哪个更适合申克孢子丝菌的酵母相转化呢?我们的研究显示,在37 ℃而不是35 ℃,发生酵母相转化的菌株数量最多,酵母细胞转化率最高,与Dixon等[7]研究显示的35 ℃适合申克孢子丝菌环境分离株的酵母相转化,而37 ℃适合临床分离株的转化现象一致。也有学者发现分离自固定型孢子丝菌病的菌株只能在35 ℃发生酵母相转化,分离自淋巴管型孢子丝菌病的菌株无论在35 ℃还是37 ℃均可发生酵母相转化[9]。本研究中分离自皮肤淋巴管型孢子丝菌病患者的菌株SUMS0382和SUMS0383,既可在35 ℃也可在37 ℃发生酵母相转化。在38 ℃仅菌株BMU00471可以转化为酵母相,其余菌株不能生长。Ghosh等[10]的研究显示申克孢子丝菌在30 ~ 37 ℃生长良好,在40 ℃生长受到了抑制,并没有明确指出在38 ℃申克孢子丝菌是否能够生长和发生转化。有学者证明钙调蛋白激酶可以调控申克孢子丝菌从菌丝相到酵母相的转化[4]。我们推测温度在申克孢子丝菌酵母相转化过程中的作用可能与钙调蛋白激酶的活性有关。

  本研究首次发现在临床常使用的PDA和SDA培养基上,申克孢子丝菌可以转化为酵母相,然而营养丰富的BHI、50 mg/kg羊血BHI和5 mg/kg GSBHI培养基上发生酵母相转化的申克孢子丝菌数量和酵母细胞的转化率明显高于PDA和SDA培养基,可见营养成分是影响申克孢子丝菌酵母相转化的重要条件。以往文献[10-12]报道申克孢子丝菌的酵母相转化使用的培养基有胱氨酸葡萄糖血琼脂基、BHI、含50 mg/kg去纤维蛋白羊血的BHI和胰蛋白酶大豆琼脂基,均可获得较好的转化率,我们利用含5 mg/kg葡萄糖的BHI培养基对申克孢子丝菌进行酵母相转化,其转化菌株的数量和酵母细胞转化率与含50 mg/kg去纤维羊血BHI培养基的一致,值得在临床推广。

  研究显示不同培养基上的酵母相菌落均在转种后的第2天开始出现,在第2 ~ 4天生长迅速,在第5天生长变得缓慢,与Robert[

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