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温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用研究           
温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用研究
℃和37 ℃时,酵母细胞生长良好,光镜下观察发现90%的菌丝可转化为酵母细胞;在36 ℃,酵母相菌株生长相对缓慢,光镜下仍可见到较多的菌丝片段和孢子;在38 ℃,菌株生长速度较36 ℃时快,但在光镜下发现转化的酵母细胞数量较36 ℃少(图2)。

  2.2.2 申克孢子丝菌在不同培养基上的酵母相转化

  在营养丰富的50 mg/kg羊血BHI和5 mg/kg GSBHI培养基平皿上,酵母相转化率均为65%,且生长最为旺盛;BHI培养基次之为45%;SDA和PDA培养基最少均为20%,且菌株在不同培养基上的转化率的差异具有统计学意义(P = 0.002,表2)。35 ℃时,在SDA和PDA培养基上菌株以菌丝相生长,而在BHI、50 mg/kg羊血BHI和5 mg/kg GSBHI培养基上则以酵母相生长。36 ℃时,在SDA和PDA培养基上菌株不能生长,在BHI、50 mg/kg羊血BHI和5 mg/kg GSBHI培养基上则以酵母相生长。37 ℃时,菌株SUMS0382、BMU02035和BMU00471在BHI、50 mg/kg羊血BHI和5 mg/kg GSBHI培养基上的酵母细胞转化率均达到90%;菌株SUMS0383在SDA、PDA和BHI培养基上的转化率均低于10%(图3)。不同培养基上的酵母相菌落均在转种后的第2天开始出现,在第2 ~ 4天生长迅速,在第5天生长变得缓慢。 在35 ℃时,菌株BMU00471在BHI、50 mg/kg羊血BHI及5 mg/kg GSBHI培养基上均可转化为酵母相,且生长良好,光镜下观察可见转化良好的呈“雪茄”样的酵母细胞(图4);而在SDA及PDA培养基上,菌株BMU00471呈现不典型的丝状菌落,并可产生棕色色素,光镜下可见大量的菌丝及“梅花”样孢子(图4)。

  3 讨 论

  本研究发现在36 ℃时4株申克孢子丝菌临床分离株均可以转化为酵母相,而在以往仅Lima等[8]报道1株申克孢子丝菌在动物体内传代以后才具备在36 ℃发生酵母相转化的能力。在我们的研究中,36 ℃时有45%培养基平皿上的申克孢子丝菌发生了酵母相转化,但其酵母细胞转化率明显低于35 ℃和37 ℃时的转化率。36 ℃时菌株转化数量及转化率却同

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