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入肝门静脉动脉化加门腔分流术对大鼠肝脏再生的影响           
入肝门静脉动脉化加门腔分流术对大鼠肝脏再生的影响
生理盐水反复冲洗各游离的血管腔。将右肾动脉从下腔静脉后方拉至其左前方,并将动脉分叉部用显微组织剪剖开并修剪成鱼口状备用,长径约3 ~ 4 mm,横径约2 mm。在门静脉主干分支处和脾静脉与肠系膜上静脉汇合处分别用无损伤血管夹阻断,在两血管夹中下三分之一处横断门静脉。修剪各断端血管外膜,以备吻合。

  在10 ~ 16倍双人双目手术显微镜辅助下,用10-0带针无创尼龙缝线将入肝门静脉主干与右肾动脉椭圆形剖面两定点连续端端吻合,缝合完毕后依次松开入肝门静脉主干与右肾动脉血管夹,成功将入肝门静脉动脉化(阻断时间8 ~ 12 min)。之后用10-0带针无创尼龙缝线将右肾静脉与远端门静脉主干(脾静脉与肠系膜上静脉汇合处)两定点连续端端吻合,完毕后松开阻断血管夹,完成门腔完全分流(阻断时间在10 ~ 12 min)。以双镊法证实吻合口通畅并检查有无漏血,若有漏血,可间断补针。肝部分切除参照Higgins[6]大鼠肝部分切除方法,切除大鼠肝脏的左叶和中叶,切除量占全肝70%。术毕经大鼠尾静脉注射1 mL生理盐水,可翻身饮水,1 d后正常饮食,单笼饲养。

  1.3 指标测定

  1.3.1 肝脏再生比率的测定

  预实验时取10只正常大鼠称体质量为(261 ± 31) g,切除全肝称湿质量,为(10.96 ± 2.24) g,再将肝脏切除左外叶、左内叶及中叶称湿质量,为(7.13 ± 1.43) g。得出肝切除部分湿质量占全肝的(68.4 ± 1.7)%,同时求得全肝湿质量占体质量的(4.76 ± 0.34)%。手术制模前大鼠称质量,根据全肝/体质量比例算出全肝理论质量,手术后称取切除之部分肝脏湿质量,实验组及肝切组分别在术后2、7、14、28 d取10只大鼠处死后取残肝标本并称取肝湿质量。根据公式计算肝再生比率: 肝再生率(%) = [mC - (mA - mB)]/(mA - mB) × 100%, 其中mA为大鼠理论全肝质量,mB为切除肝质量,mC为处死大鼠取标本时的残余肝质量。

  1.3.2 再生肝S期肝细胞比例

  3组各取5只大鼠分别于术中取1 cm3大小肝组织,术后6、24、48、72 h和7 d处死后于残余肝上取部分组织以0.5 g/L胶原酶消化,制作单细胞悬液,供

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