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【摘要】 液相芯片是20世纪90年代中期发展起来的被喻为后基因组时代的新型芯片技术，具有高通量、灵活、快速、准确、重复性好、操作简便等众多优点，可用作蛋白质和核酸等生物分子的高通量检测平台。本文简要介绍其原理、优点，并对该技术在基础研究、临床诊断等方面的应用进展作一综述。
【关键词】 液相芯片； Luminex； xMAP技术
【Abstract】 Suspension array, a novel and powerful postgenomic era tool, was first developed in 1997 based on Luminex’s xMAP technology. Featuring many remarkable advantages such as highthroughput, flexibility, rapidness and multiplexing ability, suspension array provides an open platform for assays of protein, nucleic acid and biomolecular interaction analysis. Here we provided brief introduction of its principle and advantages, and reviewed applications of this new array technology in basic research and clinical diagnosis.
【Key words】 suspension array; Luminex; xMAP technology
液相芯片，也称为微球体悬浮芯片（suspension array，liquid chip），是基于xMAP（flexible MultiAnalyte Profiling）技术的新型生物芯片技术平台，它是在不同荧光编码的微球上进行抗原抗体、酶底物、配体受体的结合反应及核酸杂交反应，通过红、绿两束激光分别检测微球编码和报告荧光来达到定性和定量的目的，一个反应孔内可以完成多达100种不同的生物学反应，是继基因芯片、蛋白芯片之后的新一代高通量分子检测技术平台。迄今为止十年时间，全球已有数百套基于xMAP技术的检测平台用于免疫学、蛋白质、核酸检测、基因研究等领域，该技术已成为一种新的蛋白质组学和基因组学研究工具，也是最早通过美国食品与药物管理局（FDA）认证的可用于临床诊断的生物芯片技术。
1 液相芯片技术的原理
液相芯片体系由许多大小均一的圆形微球（直径5.5～5.6 μm）为主要基质构成，每种微球上固定有不同的探针分子，将这些微球悬浮于一个液相体系中，就构成了一个液相芯片系统，利用这个系统可以对同一个样品中的多种不同分子同时进行检测，这种被称之为xMAP的检测技术是1997年由美国Luminex公司开发出来的。
在液相系统中，为了区分不同的探针，每一种固定有探针的微球都有一个独特的色彩编号，或称荧光编码。在微球制造过程中掺入了红色和橙色两种荧光染料（这两种染料各有10种不同区分），从而把微球分为100种不同的颜色，形成一个具有独特光谱地址的含有100种不同微球的阵列。不同颜色微球在分类激光激发下产生的荧光互不相同，这种分类荧光是识别不同微球的唯一途径。利用这100种微球，可以分别标记上100种不同的探针分子。
检测时先后加入样品和报告分子与标记微球反应，样品中的目的分子（待检测的抗原或抗体、生物素标记的靶核酸片段、酶等）能够与探针和报告分子特异性结合，使交联探针的微球携带上报告分子藻红蛋白，随后利用仪器（如Luminex 100）对微球进行检测和结果分析。Luminex 100采用微流技术使微球快速单列通过检测通道，并使用红色和绿色两种激光分别对单个微球上的分类荧光和报告分子上的报告荧光进行检测。红色激光可将微 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] 下一页 |
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