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样本中的多种微生物或多种血清型的特异抗体，与传统的ELISA相比，在检测结果上相关性好，更加灵敏，最低检测浓度可比ELISA低100倍，动态检测范围更宽，不必检测多种稀释度的血清，从而可提高检测的准确性，更能大大减少操作和时间，节约样品用量和费用。Villa［12］用液相芯片法在一项随机、双盲、安慰剂对照的多中心Ⅱ期试验中测定特异抗体水平，评价预防性四价HPV疫苗（HPV 6、11、16、18）的效果。Komatsu［13］用液相芯片技术检测肿瘤患者经肿瘤肽疫苗免疫接种后的血清抗肽抗体水平，该方法可迅速、准确地测定这6种抗肽抗体，检测结果与ELISA大致相同，它不仅与ELISA同样灵敏，而且血清样品用量少，检测成本低，耗时短。以检测100种抗肽抗体计算，液相芯片仅需血清1.5 μl，而ELISA需要900 μl；此外，液相芯片成本大约为ELISA的1/10，而检测1000名患者血清所需时间仅为ELISA的1/240。还有许多其它相关研究，如同时定量检测破伤风、白喉类毒素、流感嗜血杆菌B型多糖血清抗体，4种脑膜炎球菌血清型的血清IgG，23种肺炎球菌荚膜多糖血清型特异性IgG抗体等。
3.4 HLA分型
人类白细胞抗原（HLA）是目前所知人体最复杂的遗传多态系统，HLA不但与个体对某些疾病（如强直性脊柱炎）的易感性有关，其最重要的用途还在于器官移植之前的组织配型。传统的血清学和细胞学配型检测方法耗时较长，难以快速向临床医生报告结果，而液相芯片技术为其提供了一个更好的选择，既可以用血清学方法检测抗HLA抗体，也可用分子生物学方法直接检测等位基因。
利用液相芯片技术进行HLA血清学分型的灵敏度高于ELISA，而且还具有ELISA所不能比拟的高通量、省时和高效率，如ELISA 3 h仅能检测10个标本，而液相芯片可做94个标本，非常适用于临床。
目前市场上用于组织配型的商品化体外诊断试剂盒有One Lambda 公司的LABScreen、Orchid Diagnostics公司的LifeMatch ID ClassⅠ/Ⅱ试剂盒、Tepnel Lifecodes公司的Lifecodes ClassⅠ/Ⅱ ID等，其原理是在微球上交联各种纯化抗原，检测人血清中的HLA Ⅰ类和Ⅱ类抗体。有研究认为液相芯片法检测抗体的灵敏度优于ELISA、补体介导的微量细胞毒试验和流式细胞术。因此，利用液相芯片进行HLA抗体研究的方法在临床上得到了广泛应用，如Zhang［14］通过监测同种异体肾移植患者移植术后抗供体HLA抗体的产生，认为该抗体的产生与急性体液排斥反应及肾移植物早期功能障碍强烈相关。
利用液相芯片进行HLA基因分型的报道也不少见。Itoh［15］利用在微球上交联的寡核苷酸探针做PCRSSOP进行了HLAA、B、C和DRB1位点的高通量DNA分型，对1018名日本志愿者的DNA分析结果表明，该方法与核苷酸测序法相比，其准确率>99.9%，96个标本从提取DNA到确定4个HLA位点的基因型仅需5 h，是一种高通量、简单、快速的HLA分型方法。在商品化试剂盒方面，One Lambda 公司的LABType SSO以及Tepnel Lifecodes公司的LifeMatch HLASSO 分型检测试剂盒即是将生物素标记的PCR靶片段与交联于微球上的序列特异性寡核苷酸探针进行杂交，可检测出HLAA、B、C、DP、DQB1、DRB1、DRB3、4、5位点上的等位基因。
3.5 分析基因表达
Flagella［16］采用支链DNA（branched DNA）与液相芯片技术相结合的方法，直接从细胞裂解物、组织匀浆中定量检测10种基因的mRNA表达情况，并可区分同源性大于95％的基因。该方法无需RNA纯化或者靶基因扩增过程，而用支链DNA放大信号。其特异性高，交叉反应<0.2％，检测灵敏度为25 000个RNA转录本。
小分子RNA（miRNA）是一组保守的单链短RNA，约22个核苷酸长度，它们具有重要的基因表达调控作用，是目前各国学者的研究热点。Lu［17］用液相芯片技术对来自334个标本（包括多种人类肿瘤）的217种哺乳动物miRNA进行了表达分析。观察到miRNA表达 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] 下一页 |
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