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多种自身抗体联合检测在类风湿性关节炎诊断中的应用           
多种自身抗体联合检测在类风湿性关节炎诊断中的应用

                    作者:赵玲莉,刘淑敏,马慧英,王芳

【摘要】  目的: 探讨多种自身抗体联合检测在类风湿性关节炎(RA)早期诊断中的意义. 方法: 采用散射比浊法检测类风湿因子(RF);间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA),抗角蛋白抗体(AKA);ELISA法检测抗Sa抗体,抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体);斑点法检测抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA). 结果: 各组自身抗体检测的阳性率比较,抗AKA抗体,RF和抗CCP抗体的阳性率较高,分别为46.8%,45.8%和61.4%,为多种自身抗体联合检测中的最佳实验;RF,抗CCP抗体,抗AKA抗体三种抗体联合检测RA,为较好的组合项目,在RA检测中有较高的应用价值. 结论: 选择适当的自身抗体指标联合检测有助于提高RA检测的阳性率.

【关键词】  自身抗体;关节炎,类风湿;类风湿因子

    0引言

    风湿病是由不同病因引起并以累及多器官损伤为特征的自身免疫性疾病,临床上多有反复发作性和渐进性,典型的特征是存在多种变异体和重叠综合症,给诊断带来一定困难[1]. 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的早期临床表现不典型,且多样性[2],至今仍没有大家公认的特异的生化、免疫或组织学诊断指标,常造成误诊,其单项自身抗体检测的灵敏度和特异性均有不足,类风湿因子的检出率偏低[2-3]. 因此,诊断以特定的症状,检出特定的自身抗体为依据,寻找合适的检测项目是提高RA早期确诊率的关键. 我们通过对RA患者进行多种自身抗体的联合检测,以探讨RA早期诊断的临床意义.

    1材料和方法

    1.1材料标本选择我院200701/200712风湿专科门诊确诊为RA患者96例(RA组),年龄50~65岁. 其中63例其他自身免疫疾病患者:系统性红斑狼疮(SLE) 45例(SLE组);干燥综合征(PSS)8例(PSS组);系统性硬化症(SSc)10例(SSc组). 另外选择近期在我院健康体检者30例,作为对照组. 类风湿因子(rheumatoid factor,RF)检测试剂(浙江伊利康公司);抗核抗体(antinuclear antibodies,ANA),抗角蛋白(antikeratin antibodies,AKA)抗体,抗Sa抗体,抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)抗体(抗CCP抗体),抗聚角蛋白微丝蛋白(antifilaggrin antibody,AFA)抗体检测试剂(德国欧蒙公司).

    1.2方法

    1.2.1RF检测(散射比浊法)人微球蛋白胶合于乳胶微粒,与待测样本中的RF发生免疫反应,引起微粒的凝集,增加浊度,>20 IU/mL为阳性.

    1.2.2抗ANA抗体,抗AKA抗体检测(间接免疫荧光法)稀释血清(ANA起始稀释度1∶100,AKA起始稀释度1∶10)与包被基质反应,抗原与抗体结合,加入荧光素标记,与基质上的抗体反应形成特异性荧光. ANA阳性可根据不同的荧光模式进行判定其阳性结果,AKA阳性于角质层出现线性或板层状荧光判定为阳性.

    1.2.3抗Sa抗体,抗CCP抗体检测(ELISA法)将稀释血清加入包被孔,血清中的特异性抗体与包被在固相上的抗原结合,酶标记的抗人抗体与已结合的抗体反应,结合的标记抗体与底物液作用阳性呈现蓝色,颜色深浅与抗体浓度成正比.

    1.2.4抗AFA抗体检测(斑点法)将已稀释标本加入反应板,稀释血清中的抗体与抗原结合,酶标记的抗人抗体与结合的抗体反应,加入底物液显色,阳性出现蓝色条带,条带颜色深浅与抗体含量成正比.

    统计学处理:应用SPSS10.0软件

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