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主成分分析对佛手最佳产地的探讨           
主成分分析对佛手最佳产地的探讨

                  作者:崔红花 高幼衡 蔡鸿飞 魏志雄 何巧君

【摘要】    [目的]分析不同产地佛手中生物活性成分分布规律,探索佛手最佳产地的优选方法,以确定最佳产地。[方法]采用三维高效液相色谱法,梯度洗脱,测定17批不同产地佛手中5种生物活性成分(柠檬油素、67二甲氧基香豆素、橙皮苷、5羟基7甲氧基8异戊烯基香豆素、6羟基7甲氧基香豆素)的含量,并对其进行主成分分析。[结果]所建模式合理,具有一定的可行性和可靠性,为探讨佛手最佳产地提供了一种新的方法。[结论]佛手最佳产地以广东肇庆为最佳。

【关键词】  佛手/化学 主成分分析 色谱法 高压液相

  佛手为芸香科柑桔属植物佛手Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle的干燥果实,主产于我国广东、四川、浙江等地,其花、叶和果实均可入药,其味辛苦酸,性温,入肝、胃经,具有疏肝理气、和胃止痛的功效,用于治疗肝胃气滞、胸胁胀痛、胃脘痞满、食少呕吐等症[1-3]。药理实验证明佛手提取物及有效成分具有祛痰、镇痛、抗菌抗炎、溶胆结石、抗蝮蛇毒素、利尿、局麻、抗癌等多种功效[3-6],在我国已经有400多年的种植和应用历史。

  佛手始载于《本草纲目》,我国的佛手药材种类较多,来源复杂,古代常与枸橼、香橼等相混淆,历来按产地可分为广佛手、川佛手、金佛手、建佛手、云佛手和兰佛手等,现行规格主要分为广佛手、川佛手及金佛手,何种最优,各有说法[7]。由于佛手在当前国内外市场的需求量日益增大,目前品种混乱、质量参差不齐,若无相应的标准控制,很可能大大影响临床效果。化学成分分析结果表明佛手是一种富含香豆素类化合物的植物,同时还含有黄酮类、柠檬苦素类等成分[8]。关于不同产地佛手多种生物活性成分含量分析的研究尚未见报道,只见关于橙皮苷单一成分的含量研究[9]。仅针对中药材的某个成分或指标成分分析最佳产地,难于真正反映其质量。本研究将香豆素及黄酮类化合物作为参照物,应用三维高效液相色谱(HPLCDAD)法,采用SPSS统计软件进行主成分分析,对佛手的产地问题进行综合分析,为探讨最佳产地及其药材质量评价方法的建立提供新的模式,现报道如下。

  1 材料

  1.1 药物 收集17批不同产地佛手药材(主产地或商品,药材来源见表1),经广州中医药大学程怡教授鉴定;对照品柠檬油素、67二甲氧基香豆素、5羟基7甲氧基8异戊烯基香豆素、6羟基7甲氧基香豆素均为作者从川佛手植物中提取分离得到,橙皮苷由生物药品制品检定所提供(将它们依次编号为化合物1~5),经波谱分析鉴定结构,归一化法计算其质量分数为98%以上。

  1.2 主要试剂与仪器 美国DIONEX SUMMIT P680高效液相色谱仪(四元梯度泵,CHROMELEONTM数据处理软件系统);甲醇、乙腈为色谱纯(美国Dikma公司,色谱用);水为自制超纯水;乙酸乙酯、甲醇、乙醇(广州化学试剂厂,提取用)均为分析纯。

  2 方法与结果

  2.1 流动相及梯度洗脱条件的选择 化合物3~5结构中均含有酚羟基,化合物1、2中含有含氧基取代,因而它们在分析时很容易产生拖尾,使峰变宽,分离度下降,因此要选择偏酸性的流动相,这样才能减少色谱峰的拖尾,改善峰形,提高峰形的对称程度。在比较了甲醇-冰醋酸水系统和乙腈-冰醋酸水洗脱系统色谱分离效果后,最终选择乙腈-冰醋酸水洗脱系统,并通过多次对比试验确定了最佳的梯度洗脱系统。在乙腈-冰醋酸水梯度洗脱系统中,样品中化合物1~5能得到基线分离,而且色谱的对称性都很好。表1 佛手药材的来源

  样品号样品来源产地采收期规格购买日期F1吉林省片2005.05.04F2天津市丝2005.04.29F3昆明市云南片2005.04.25F4浙江金华市尖峰大药房连锁有限公司淅江金华(广东苗)片2005.04.18F5秦皇岛市唐人医药商场广西2004.03.10片2005.05.08F6秦皇岛市唐人医药商场广东2004.07.05片2005.05.08F7河北祺新中药颗粒饮片有限公司广东2004.7~8片2005.03.20F8河北祺新中药颗粒饮片有限

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