本文由中国论文联盟医学院动物养殖中心,动物合格证号:SCXK(京)20050013。小鼠预饲养7 d,随机分为3组,分别为空白对照组(A)、衰老模型组(B)、衰老用药组(C),均以基础饲料喂养。
1.2 药品和试剂
D半乳糖购于北京三博远志生物技术有限责任公司,Sigma公司生产。血尿素氮(BUN)试剂盒(北京北化康泰临床试剂有限公司,批号:20061206),血乳酸(BLA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。怀山药:购于北京同仁堂唐山分店。
1.3 方法
1.3.1 山药水煎液的制备
称取山药片100 g,粉碎后按1∶8比例加水,60~80℃热水提取4 h,收集提取液,浓缩至100 ml。试验时用生理盐水配成所需浓度。
1.3.2 衰老模型制备和给药方法
A组腹腔注射生理盐水(50 mg·kg-1·d-1),B、C组腹腔注射D半乳糖(50 mg·kg-1·d-1),连续60 d。第46天,A、B组灌胃蒸馏水(50 mg·kg-1·d-1),C组腹腔注射D半乳糖的同时灌胃山药水煎液(50 mg·kg-1·d-1),连续给药15 d。每天记录小鼠体重变化,以调整给药剂量。
1.3.3 力竭游泳试验
第61天进行力竭游泳试验,将同组小鼠分别放入恒温水槽(水深>30 cm)、水温(25±1)℃,进行力竭游泳试验,当鼠头沉入水下5 s不能抬起并不能完成翻正反射计时停止,为力竭游泳时间。
1.3.4 生理指标测定和统计
1.3.4.1 小鼠体重、胸腺重量、脾脏重量、胸腺指数、脾指数及体重增重率统计
A、B、C三组小鼠每3天称重一次,取每组平均值记录。试验结束将剖取的胸腺、脾脏用澳豪斯AdventurerTM天平称湿重并计算其指数。脏器指数=脏器重量/体重(mg/10 g)。增重率=(试验后体重-试验前体重)/试验前体重×100%。 1.3.4.2 BUN、血红蛋白(Hb)含量的测定 将采得的血液迅速用TGL16G冷冻离心机(上海安亭 科学 仪器厂)离心5 min(3 000 r/min),取上清液,用BUN试剂盒和722S可见分光光度计(上海棱光技术有限公司)测定BUN、Hb含量(可见光比色法)。
1.3.4.3 切片制备
称重后的小鼠胸腺、脾脏迅速固定,常规石蜡切片,HE染色。光镜下观察三组小鼠胸腺、脾脏组织结构,显微拍照。
1.4 统计学方法
所有数据采用统计软件SPSS11.5进行方差分析和多重比较(LSD),数据以x±s表示。
2 结 果
2.1 山药对小鼠体重增重率和力竭游泳时间的影响 A、B、C三组小鼠的体重增重率分别为(14.88±3.39)%,(12.88±6.9)%,(13.87±5.51)%;组间比较无显著性差异(P>0.05)。力竭游泳时间B组最短〔(96.28±9.63)min〕,与A组〔(135.05±12.73)min〕差异显著(P<0.05);C组〔(116.83±15.94)min〕与A组差异无统计学意义,与B组比较,有显著性差异(P<0.05)。灌胃山药水煎液的C组力竭游泳时间显著长于B组。本文由中国论文联盟教育 学报,2007;24(2):1258.
5 Brotto MA,Nosek TM,Kolbeck RC.Influence of ageing on the fatigability of isolated mouse skeletal muscles from mature and aged mice〔J〕.Exp Physiol,2008;87(1):7782.
6 冉 靓,杨小生,王伯初,等.抗氧化剂多糖的研究进展〔J〕.时珍国医国药,2006;17(4):4946.
7 王林丽,孟德胜.山药及其制剂的临床应用进展〔J〕.中国药业,2005;14(5):778.
8 曾 明,李守汉,郭层城,等.松针提取液对运动能力的影响〔J〕.天津体育学院学报,2005;20(2):6971.
9 宋 刚,郑红英,杨永亮.中药抗运动性疲劳的作用及机理〔J〕.辽宁体育科技,2006;28(3):323.
10 袁书林.山药的化学成分和生物活性作用研究进展〔J〕.食品研究与开发,2008;29(3):1769.
11 周美娟,段相林.人体组织学与解剖学〔M〕.第3版.北京:高等教育出版社,2000:11920.
12 杜博雨,姚振江,李 蓉.胸腺增龄性萎缩的机理及其逆转〔J〕.中国免疫学杂志,2002;18(2):1435.
13 唐孝礼,颜光美,许实波.海蛾提取物对小鼠免疫器官重量和抗应激能力的影响〔J〕.中药材,1999;22(6):3002.
14 陈艳珍.酸奶对老年雌性小鼠免疫功能和游泳耐力的影响〔J〕.营养学报,2007;29(3):2989. |