| 关于玉米种子萌发过程中淀粉酶活力变化研究 |
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> 1.2试验方法
1.2.1酶液提取[2-4]。称取0.5 g萌发中的玉米种子,冰浴状态下置研钵中加少量石英砂和2 mL左右的蒸馏水,研成匀浆,转入25 mL刻度试管加蒸馏水稀释至刻度,混匀后在室温(20 ℃)下放置,每隔数分钟振荡1次,提取15~20 min。3 000 r/min离心10 min,转出上清液备用。取酶液2 mL,用蒸馏水稀释至100 mL,即为淀粉酶稀释酶液。
1.2.2淀粉酶活力测定[2,5-6]。将淀粉酶稀释液与1%淀粉溶液于40 ℃恒温水浴准确计时保温10 min,取出后向测定管中加入4 mL 0.4 moL/L的氢氧化钠,终止酶活动。再向各管分别加入40 ℃下预热的1%淀粉溶液1 mL,摇匀,立即放入40 ℃恒温水浴准确计时保温5 min,取出后向测管中加入4 mL 0.4 moL/L的氢氧化钠,终止酶活动,准备测糖。用3,5-二硝基水杨酸法测定反应生成还原糖。
1.2.3淀粉酶活力计算。淀粉酶活力(mg麦芽糖/(g鲜重·5 min))=(A-A0)×VT/(W×VU)。其中,A为淀粉酶共同水解淀粉生成的麦芽糖量(mg);A0为淀粉酶的对照管中麦芽糖量(mg);VT为样品稀释总体积(mL);VU为比色时所用样品液的体积(mL);W为样品重(g)。
2结果与分析
2.1麦芽糖标准曲线绘制
试验所得麦芽糖标准曲线为:y=0.770 1 x-0.023 0。
2.2玉米淀粉酶活力
由表1可知,在萌发过程中玉米种子淀粉酶活力逐渐上升,萌发第3天开始上升最快,至第5天时上升趋势渐缓。
3结论与讨论
淀粉酶分为α-淀粉酶和β-淀粉酶,玉米种子在萌发前只存在β-淀粉酶,并且酶活力很低,其在萌发过程中快速上升;α-淀粉酶是种子在萌发过程中诱导产生的,并且随时间增加酶活力不断上升[7]。淀粉酶是加水分解淀粉的酶的总称,其对淀粉的分解作用是生物体利用淀粉进行新陈代谢的初级反应,也是工业上利用淀粉的依据。因此,淀粉酶的活性测定具有理论和应用研究意义。淀粉酶活力的测定方法有硝基水杨酸法和凝胶扩散法2种[8],本试验中因所用材料量较少,故采用硝基水杨酸法测定淀粉酶活力。 中国论文联盟http://*编辑整理。
4参考文献
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