证明dh－plc方法可以区别含量相差500倍的两个等位基因，这使多份样本的混合检测成为可能。同时荧光标记单链，使色谱图的解释变得更加容易。美国transgenomie公司在waveor核苷酸片段分析系统技术平台基础上，开发出一种后荧光检测技术。在所有分析条件不变的情况下，被检测的核酸片段经dhplc分离之后在混合室中与荧光试剂混合，然后进行检测，不仅可以提高灵敏度上百倍，而且不需要昂贵的荧光标记引物。近年来电喷雾离子化一质谱(eis－ms)作为一种重要的结构分析工具与ir－rp－hplc联用也已应用于核酸分析领域，该联用技术不仅可以确证被分离的单链dna的成分特性，还可以确证扩增的pcr产物的基因型。众所周知，在核酸的质谱分析中为了获得高置信度的分析结果，对分析物进行适当的脱盐和去除小分子量杂质是必不可少的，这也正是hplc－ms的魅力所在，但质谱的高成本使该项技术较难推广使用，

4 总结

dhplc用来检测dna突变和单核酸多态性，可以取代传统分子生物学技术，不需要制备凝胶，检测dna片段做到了全自动、高效、快速、准确，在疾病相关基因突变检测方面提供了有效的技术手段，是一种快速有效的基因突变筛查方法。dhplc技术也有不足之处：对pcr要求很高；不能直接检测出纯合突变，只能提供个体样本有无突变的信息，但无法得出具体的突变类型；当有多个片段需要检测时，由于有多个解链温度，需要多步检测，增加了工作量等。尽管如此，在目前的检测手段中，dhplc仍是一种快速、高效、准确、经济及半自动化筛查基因杂合突变的工具，优于测序等其他分子生物学方法，相信在未来的基因组学研究领域中必将继续发挥重要的作用。

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