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, 使机体对OPN的免疫应答状态发生了变化。我们用构建的pTriEx1hOPN转化大肠杆菌Tuner（DE3）placI后成功表达出OPN蛋白, 我们所表达的重组OPN蛋白在SDSPAGE电泳中表现Mr为55 000, 大于其计算Mr（33 000）。OPN的这种异常电泳行为与Helluint等［6］的报道一致。我们经免疫融合筛选后获得2株抗人OPN特异性mAb, 用间接ELISA方法测得其纯化腹水效价均在1∶10 000以上, 且为识别OPN不同抗原表位的mAb, 可能用于双抗体夹心法测定OPN的水平。通过免疫组织化学方法对不同时期的正常子宫内膜的OPN的检测表明, 子宫内膜腺上皮在增生期、 分泌早期, OPN呈弱阳性表达; 分泌中、 晚期OPN呈强阳性表达, 与有关报道一致［7］。抗人OPN mAb的成功制备不但具有良好的临床应用前景, 也为我们进一步研究OPN表达与生殖疾病的关系打下了良好基础。
【参考文献】
［1］ Khan SA, Cook AC, Kappil M, et al. Enhanced cell surface CD44 variant(v6, v9)expression by osteopontin in breast cancer epithelial cells facilitates tumor cell migration: Novel post transcriptional, post translational regulation［J］. Clin Exp Metastasis, 2005, 22(8): 663-673.
［2］ Rittling SR, Chambers AF. Role of osteopontin in tumor progression［J］. Br J Cancer, 2004, 90(10): 1877-1881.
［3］ Kim JH, Skates SJ, Uede T, et al. Osteopontin as a potential diagnostic biomarker for ovarian cancer［J］.JAMA, 2002, 287(13): 1671-1 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] 下一页 |
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