| 基于发光金纳米粒子荧光增强法测定溶菌酶 |
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中国论文联盟*编辑。摘 要 参照文献方法合成了BSA修饰的水溶性发光金纳米粒子，并考察了其与溶菌酶之间的相互作用。依据溶菌酶对金纳米粒子的发光增强现象，建立了测定溶菌酶的荧 光新方法。考察了发光金纳米粒子的浓度、pH值、反应时间及共存物质对测定的影响。优化条件为：发光金纳米粒子浓度4.0 ×10－6 mol/L、pH 7.0、反应时间 10 min。在此条件下，荧光增强与溶菌酶浓度在2×10－7～8×10－6 mol/L范围内呈良好的线性关系，检出限为3.0×10－8 mol/L。对4.0 ×10－6 mol/L溶菌酶平行测定6次，相对标准偏差为2.6%。本方法具有灵敏度高、探针水溶性好和生物毒性低的优点，同时，常见低等电点蛋白质对分析不干扰。 本方法用于合成样品及鸡蛋清中溶菌酶含量测定，平均回收率为97.5%～103.6%。
关键词 溶菌酶； 发光金纳米粒子； 荧光方法
1 引 言
溶菌酶是一种高等电点的酶\, 广泛存在于身体组织以及分泌物中。鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的体液及微生物中也含有此酶, 其中蛋清中含量最丰富。溶菌酶具有天然、易消化、易吸收、无毒性等优点, 并具有溶解一些细菌的特性\。从鸡蛋清中提取的溶菌酶\还可以替代一些化学合成药物， 用于食品防腐\。此外，研究表明， 尿液和血清中溶菌酶的增加会导致白血病\，肾脏疾病\和脑膜炎\等。因此，溶菌酶已被广泛应用于生物工程和医疗领域。目前，有关溶菌酶 的分析方法主要有动态浊度法\和溶板法\。近年来， 高灵敏测定溶菌酶的荧光方法也有报道, 由于溶菌酶本身不具有荧光，一些外源探针，主要是CdSe2/CdS和CdSe以及CdHgTe等发光量子点\被广泛采用。
近年来，纳米尺寸的贵金属粒子由于其独特的发光性能备受关注\。与上述发光量子点相比，直径小于5 nm的发光金纳米粒子（Luminescent gold nanoparticles, GNPs） 具有制备简单、生物相容性好等优点，尤其是低毒性探针可能更适合分析一些含生物酶的系统。目前，利用各种方法制备的GN[1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] ... 下一页 >> |
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