Fig  4  Expression of CIB protein in SHG44 cells with Western blot analysis

　　1:  Antibody purified by protein G;  2:  Antibody purified by CIB.

　　2.5  免疫荧光染色检测CIB的亚细胞定位  为了确定CIB的亚细胞定位, 实验用免疫荧光方法对SHG44细胞、 Hhu7细胞内CIB蛋白的表达进行鉴定。发现在这2种细胞内,  CIB蛋白均以细胞质定位为主, 尤其在核周表达密集, 同时细胞核中也有少量表达（图5）。

　　图5  CIB蛋白在SHG44、 Huh7细胞中的表达定位（略）

　　Fig 5  location identified by immunohistochemistry (×200)

　　A:  SHG44 cell;  B:  Huh7 cell.

　　3  讨论
   
　　Bernstein等［4］的研究表明, CIB在多种组织的广泛表达表明它可能参与各种不同的细胞生物学过程。已有研究也证实, CIB可与许多蛋白［5-7］发生相互作用, 在DNA损伤修复、 细胞周期调节、 细胞凋亡、 神经系统早期发育、 神经元的存活及可塑性、 Alzheimer’s病的发生等方面发挥不同的作用, 由此可见对其进行深入研究是非常必要的。
   
　　抗体是研究基因功能的重要工具, 制备一种效价高、 特异性好的抗体, 是研究疾病相关基因的表达、 定位和生物学功能非常重要的一步。我们通过重组表达获得了CIB蛋白, 并以此为抗原制备了相应的抗血清。本实验采用的抗原CIB相对分子Mr较小（22 000）, 为了解决抗原分子量小对抗原免疫原性的影响, 通常将抗原与佐剂混合以提高抗原的免疫原性。P

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